长链非编码RNA XLOC009038在食管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭中的作用研究

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目的:通过相关实验技术探究长链非编码RNA XLOC009038对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等生物学特性的影响。方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术测定食管癌细胞株EC109、EC9706、Kyse150及TE-1细胞株中长链非编码RNA XLOC009038的表达量,构建干扰质粒并转染实验组细胞使长链非编码RNA XLOC009038下调,利用qRT-PCR技术检测干扰效率并筛选出基因下调效果最佳的细胞株。应用MTT比色法、克隆形成实验观察基因下调前后细胞增殖、克隆能力的变化;流式细胞技术检测细胞凋亡情况;Transwell测定转染前后细胞迁移及侵袭能力的变化;Western blot检测转染前后细胞内procaspase3蛋白表达量。结果:qRT-PCR结果显示EC109、EC9706、Kyse150三种细胞内长链非编码RNA XLOC009038均呈高表达状态;转染干扰质粒后EC109、EC9706两株细胞中基因的表达量低于对照组(P<0.05),且干扰效率最高。MTT比色法实验显示EC9706细胞株实验组在转染24h后OD值为(0.27±0.01)低于对照组(0.37±0.02),差异具有统计学意义(t=8.21,P<0.05),EC109细胞株转染48h后实验组OD值(0.35±0.02)低于对照组(0.46±0.02),差异具有统计学意义(t=9.59,P<0.05);EC109、EC9706两株细胞在下调XLOC009038基因后克隆形成率降低(P<0.05);Transwell技术显示,EC109细胞株实验组迁移细胞数为(55.20±8.90)少于对照组(167.80±9.91),EC9706细胞株实验组迁移细胞数为(52.20±9.04)少于对照组(108.80±6.38),两株细胞实验组与对照组迁移细胞数差异均具有统计学意义(P<0.05);EC109细胞株实验组侵袭细胞数为(44.80±9.60)少于于对照组(72.80±7.26),差异具有统计学意义(t=18.90,P<0.001);EC9706实验组侵袭细胞数为(57.20±15.43)少于对照组(130.80±15.54),差异具有统计学意义(t=7.51,P<0.001);流式细胞技术显示下调XLOC009038后EC109、EC9706两株细胞实验组凋亡率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot技术显示EC109细胞株实验组干扰XLOC009038后灰度值为(1.09±0.03)高于对照组(0.74±0.13),差异具有统计学意义(t=5.19,P<0.05),EC9706细胞株实验组灰度值为(1.06±0.31)高于对照组(0.56±0.03),差异具有统计学意义(t=3.20,P<0.05)。结论:长链非编码RNA XLOC009038在EC109、EC9706、Kyse150三种食管癌细胞株中均呈高表达状态;下调XLOC009038可抑制食管癌EC109、EC9706细胞株的增殖、迁移、侵袭能力,并可能通过影响procaspase3的表达来调控食管癌细胞的凋亡来发挥生物学作用;所以过表达的XLOC009038可能与食管癌的发生发展密切相关,对长链非编码RNA XLOC009038深入研究在揭示食管癌的发生发展及其防治工作中具有一定的价值。
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