人胎盘、脐带及骨髓源性间充质干细胞生物学性状的比较

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wocaonima3344521
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目的:比较人胎盘、脐带及骨髓源性间充质干细胞(MSCs)的生物学性状。  方法:采用组织块贴壁培养法分离培养人胎盘、脐带源性基质细胞(SCs),采用密度梯度离心法分离培养人骨髓源性SC。采用流式细胞仪检测CD29、CD34、CD44、CD133、HLA-DR、vWF的表达及细胞周期。应用MTT法检测并比较三种SCs的增殖情况。应用免疫荧光技术检测并比较MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三种SCs的表达情况;在体外诱导三种SCs向成骨细胞、脂肪细胞、神经细胞方向分化,并通过特异性染色鉴定并比较其分化能力。  结果:采用组织块贴壁法能成功获得贴壁生长的成纤维样人胎盘、脐带源性SCs,采用密度梯度离心法能成功获得贴壁生长的骨髓源性SCs;流式细胞术分析结果示,人胎盘、脐带及骨髓源性SCs高表达CD29、CD44,阴性表达CD34、CD133、HLA-DR及vWF,细胞周期结果示,三种SCs大部分均处于G0/G1期,仅少数处于分裂期,但脐带源性SCs处于G0/G1期细胞最多,而处于S期细胞最少,处于G2M期细胞介于胎盘及骨髓源性SCs之间;免疫荧光示MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三种SCs中表达情况相似,即均为阳性表达,且荧光定位在细胞的胞浆;MTT检测结果显示,胎盘与脐带源性SCs增殖较快,两者增殖速率无差异。三种SCs经向脂肪细胞诱导后油红O染色阳性,但脐带源性SCs分化为脂肪细胞的数量多,着色深;向成骨细胞诱导后茜素红染色为阳性,向神经细胞诱导后,NSE表达阳性,但胎盘源性SCs分化为成骨细胞及神经细胞的数量多,着色深。  结论:(1)人胎盘、脐带组织中富含间充质干细胞。(2)人胎盘、脐带与骨髓源性MSCs均表达MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin,但骨髓源性MSCs中P75NTR的表达较弱。(3)人胎盘及脐带源性MSCs具有更强的增殖能力。(4)人胎盘、脐带及骨髓源性MSCs分化为特定细胞的潜能不同。
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