球毛壳ND35在宿主植物上的侵染定殖及其菌肥研制初探

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球毛壳(Chaetomium globosum) ND35是一株优势内生真菌。本论文以杨树组培苗和黄瓜幼根为试材,研究了球毛壳ND35子囊孢子萌发后在宿主植物上的侵染定殖方式和途径。研制了以球毛壳ND35子囊孢子为主要成分的微生物肥料,通过温室试验和大田试验,初步研究了微生物肥料对作物生长的影响。在离体条件下,以毛白杨组培苗和黄瓜幼根为宿主植物,借助光学显微镜、扫描电镜,结合免疫荧光标记技术,研究了球毛壳ND35子囊孢子萌发后在毛白杨根、茎、叶和黄瓜幼根上的侵染行为及其菌丝在杨树组培苗根部的定殖。结果显示,子囊孢子萌发后形成的菌丝,能从宿主根、茎部表皮细胞间隙侵入,也可以形成附着胞或菌丝足,进而形成侵染钉直接从表皮细胞侵入;在叶部主要从气孔侵入叶片内部。侵入根部的菌丝主要定殖于表皮细胞,极少侵入根毛内部,但未发现进入内皮层和维管束组织。利用台盼蓝、异硫氰酸荧光素(FITC)、Cy3荧光素染色法检测自然条件下黄瓜根上球毛壳ND35的侵染定殖情况。结果显示,球毛壳ND35能在黄瓜毛细根表面附着、定殖,菌丝经由菌丝足侵入黄瓜根内部,或从表皮细胞间隙侵入。侵入根内的菌丝主要定殖在皮层。球毛壳ND35在4℃下保藏30个月后,子囊孢子萌发率依然保持在85%以上,说明球毛壳ND35可以长期存放,这为延长以子囊孢子为主要成分的微生物肥料的货架期提供可能。用麦粒培养球毛壳ND35能获得的孢子产量是2.8×106个/ml,大于其它几种菌糠培养料的产孢量,但差异性不显著。而且麦粒成本高,可以考虑利用菌糠进行培养,降低成本,实现废弃物再利用。四种菌糠制备的球毛壳ND35肥料均对黄瓜的根长、株高、根鲜重、地上鲜重有促进作用,且棉籽壳和木耳菌糠制备的肥料处理效果最好,两种肥料所含孢子含量最大,可以考虑利用棉籽壳和木耳菌糠作为载体进行培养。还对蛭石作为填料的可行性进行研究,结果表明蛭石可以作为填料,以增加菌肥的稳定性。根据作物的生长规律,可以多次施用微生物肥料使促生效果更明显。在烟草的育苗和移栽时分别施用球毛壳ND35微生物肥料,通过对苗高和叶片数的分析得出,育苗时施用对苗高的影响较大,移栽时施用影响叶片数目。为了验证以球毛壳ND35子囊孢子为主要成分的微生物肥料的稳定性及对作物产量的影响,将球毛壳ND35菌肥应用于大田作物。大田黄瓜施用球毛壳ND35肥料后,能够提前开花结果,而且抗旱性得到提高,产量均高于对照组,特别是两次施用处理,单株产量提高118.30%。同时也提高黄瓜植株的根鲜重和地上鲜重。对甘薯产量促进作用最明显,单株产量提高4倍,另外蔓粗、单株薯数、单株茎叶重分别提高30.08%、93.30%、102.92%。微生物肥料对一年生的板栗、核桃苗的高生长促进作用明显,分别提高35.94%、83.05%,对地径的促进作用不明显;板栗的地上干重、根干重分别提高161.54%、52.08%,核桃的地上干重增加100.1%、根干重增加4%。
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