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背景与目的恶性肿瘤是严重危害人类生命健康的常见疾病。我国每年癌症者发病人数约160万。癌症的防治和研究正成为全世界科学家日益关注的一项重大课题。早在1865年有法国学者Armand Trousseau已观察到血栓与肿瘤之间的密切关联,目前认为其机制与凝血酶密切相关。最近研究新发现的人纤维介素(hfgl2),属于纤维蛋白原家族成员,它具有丝氨酸蛋白酶活性,因能直接裂解凝血酶原成为凝血酶,从而能启动凝血途径而在肿瘤生长和转移中发挥重要作用;前期研究还发现在常见实体肿瘤组织如结肠癌、宫颈癌、乳腺癌、食管癌、肺癌、胃癌等恶性肿瘤组织中有较为广泛的hfgl2凝血酶原酶的表达,并在其fgl2表达邻近区域可见纤维蛋白沉积。本研究通过以裸鼠皮下瘤移植模型为技术平台,检测fgl2凝血酶原酶基因沉寂前后对人类肝癌细胞株HCCLM6裸鼠皮下移植瘤生长及其血管新生的影响,并检测fgl2凝血酶原酶及其微血管密度在人类肝癌细胞株HCCLM6基因沉寂前后裸鼠皮下移植瘤中表达差异,揭示fgl2在肝癌发生和发展中的作用,并为肝癌的基因治疗提供新的靶点。方法分别运用fgl2凝血酶原酶基因干扰质粒pcDNA6.2- fgl2-miRNA、非相关序列干扰质粒pcDNA6.2-非相关序列- miRNA分别转染高侵袭人肝癌细胞系HCCLM6所获得的稳定转染细胞系HCCLM6-fgl2(-)单克隆细胞、HCCLM6-非相关质粒单克隆细胞。并运用以上稳定细胞系和人肝癌细胞株HCCLM6注入裸鼠皮下分别建立裸鼠皮下移植瘤模型,三组模型的观察终点均为42天,采取动态观察的方式,一方面对比各组小鼠肿瘤生长有关情况。另一方面并分别取出三组模型肿瘤组织,运用免疫组化法检测模型各组fgl2凝血酶原酶各组裸鼠皮下移植瘤中的表达差异及微血管密度表达差异。结果成功建立裸鼠皮下移植瘤模型;通过动态观察各组裸鼠皮下移植瘤模型,发现HCCLM6-fgl2(-)组较HCCLM6组及HCCLM6-非相关组皮下移植瘤小,皮下移植瘤潜伏期延长,皮下移植瘤成瘤率降低。免疫组化证实HCCLM6-fgl(2-)组较HCCLM6组及HCCLM6-非相关组皮下移植瘤肿瘤实质细胞fgl2表达减少,HCCLM6-fgl2(-)组较HCCLM6组及HCCLM6-非相关组微血管密度减少。结论本研究成功建立裸鼠皮下移植瘤模型各组,通过动态观察各组小鼠肿瘤生长有关情况,结果显示fgl2基因沉寂后的HCCLM6细胞能显著抑制肿瘤实体瘤生长;并运用免疫组化法实验,进一步证实fgl2基因沉寂后的HCCLM6能在一定的程度上能抑制肿瘤血管新生及fgl2的表达,提示fgl2可能通过促进血管新生从而影响恶性肿瘤的生物学行为,因此推测fgl2的促进血管生成作用是肿瘤生长和转移等病理生理改变的重要环节之一。