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目的:旨在通过不同离心速度及离心时间制备富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF),比较其内所含生长因子特别是血小板衍生生长因子-AB(Platelet-derived growth factor,PDGF-AB)和转化生长因子-β1(Transforming growth factor-beta1,TGF-β1)含量及其对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)体外增殖的情况,为将制备出优良的PRF应用于软组织创面修复提供实验依据。方法:取新西兰大耳白兔腹股沟部脂肪组织,使用胶原酶消化法处理脂肪组织,培养原代脂肪干细胞,观察细胞形态及变化,通过血球计数板于倒置显微镜下计数并绘制细胞生长曲线图,收集第3代细胞进行体外三系诱导分化,在诱导7天、14天、28天时间里,分别加入成脂诱导液培养基后行油红O染色、成骨诱导液培养基后行Von Kossa染色、成神经诱导液培养基后行免疫细胞荧光检测,鉴定ADSCs多向分化潜能;取新西兰大耳白兔自体静脉血,分别以不同速度(2700 r/min、3000 r/min、3300 r/min)、不同时间(10min、15 min、20 min)离心制备PRF,通过ELISA试剂盒对每个PRF在静置7天、14天、21天时间里,释放液中TGF-β1和PDGF含量进行检测,观察各组生长因子的浓度差异;CCK-8比色法检测不同方法制备的PRF对ADSCs细胞体外增殖活性的影响。结果:原代培养脂肪干细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,具有很强的增殖能力,并成功向成神经元细胞、骨组织细胞和脂肪细胞诱导分化,即具有干细胞特性,因而所培养的细胞为脂肪来源干细胞(ADSCs)。同一静置时间下,以2700 r/min,15 min组制备的PRF释放PDGF-AB、TGF-β1的含量显著高于10 min组及20 min组;以3000 r/min,10min组制备的PRF释放PDGF-AB、TGF-β1的含量显著高于15 min组及20 min组;且2700 r/min,15min组制备的PRF释放PDGF-AB、TGF-β1的含量显著高于3000 r/min,10 min组(P﹤0.05);以3300 r/min组的离心速度下,不同离心时间制备的PRF释放PDGF-AB、TGF-β1的含量无统计学意义(P﹥0.05)。CCK-8比色法检测2700r/min,15 min组制备的PRF对ADSCs增殖的OD值高于3000 r/min及3300 r/min组(P<0.05)。结论:来源于动物脂肪吸收物通过胶原酶消化、分离、原代培养的方法可获得大量的具有干细胞特性的ADSCs;通过精确的方法制备PRF更能促进脂肪干细胞体外增殖,有望将制备优良的PRF应用于皮肤软组织缺损创面修复。