人反义EGF和反义EGFR逆转录病毒表达载体对人胰腺癌细胞系细胞生长的影响

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinje2004_2005
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应用大豆胰蛋白酶抑制剂成功地建立了两株新的人胰腺癌细胞系PC-7和PC-48。迄今,PC-7在体外连续传代150多代,PC-48在体外也连续传代50多代。经形态观察和keratin和CEA的免疫组化鉴定证明两细胞系是人胰腺癌细胞系。两细胞系的共同特点是群体倍增时间短,细胞分裂指数高,和低二倍体染色体核型异常。 两细胞系的EGF和EGFR的免疫组化,和Nor thern blot杂交,以及PC-7细胞膜表面EGFR的125Ⅰ-EGF结合试验的结果,均表明PC-7和PC-48细胞有EGF和EGFR的进度表达。PC-7在低血清培养条件下生长缓慢,符合肿瘤细胞对血清的依赖性下降的特点。 在研究外源性EGF及其抗体和抗-EGFR抗体对低血清培养条件下PC-7细胞生长的作用时发现:(1)EGF明显刺激PC-7细胞增殖,表现在细胞计数和3H-TdR掺入均高于对照组;同时细胞生长活跃。(2)抗-EGF抗体明显抑制PC-7细胞的生长;细胞生长缓慢,形态变得毛糙、易脱落;细胞计数和3H-TdR掺入均低于对照组。(3)抗-EGFR抗体轻度刺激PC-7细胞生长;细胞生长稍加快,以及细胞计数和3H-TdR掺入均略高于对照组。 通过EGF及其抗体和抗-EGFR抗体对PC-7裸鼠移植瘤生长影响的研究发现:(1)EGF刺激肿瘤生长;肿瘤重量是对照组的136%;生长快,细胞增生极活跃;坏死少,腺腔直径小,腔内分泌物少,核分裂明显多,部分区域为低分化;胞浆内各种细胞器均明显增多。(2)抗-EGF抗体作用后,部分抑制肿瘤生长;肿瘤重量为对照组的66.7%;生长慢;体积小却大块坏死,残存的肿瘤组织周围有大量的炎性细胞浸润,核分裂少;线粒体肿胀、扩张和各级溶酶体明显增多。(3)抗-EGFR抗体轻度刺激肿瘤的生长;肿瘤重量是对照组的119%;除生长稍快于对照组外,形态同对照组。 EGF及其抗体和抗-EGFR抗体作用后的裸鼠移植瘤组织c-myc癌基因的Northern blot检测结果表明:EGF作用后c-myc的表达明显增强;而抗-EGF抗体作用后c-myc的表达明显减弱,几乎测不到;抗-EGFR抗体作用后,c-myc的表达稍减弱。
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