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目的:CD44属于粘附分子家族,是一种分布极为广泛的表面跨膜糖蛋白,主要介导淋巴细胞归巢,淋巴细胞活化,参与细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的粘附过程及肿瘤转移。近年发现,CD44及其变异体分子参与肿瘤的发生发展和侵袭转移,尤其是CD44V6在肿瘤的侵袭转移中的作用更是引起许多学者的高度重视,它可能是判断肿瘤生物学行为及预后因素的重要指标。nm23作为肿瘤转移抑制基因,nm23-H1可能在转移抑制中起重要作用。肾癌的发病机制目前尚不清楚,因此对这两种基因及其表达产物的研究,是揭示肾癌发病机制的重要途径。国内外多应用免疫组化和RT-PCR方法检测CD44V6、nm23-H1基因或蛋白在肾癌中的表达进行研究,本文应用流式细胞术方法对肾癌及癌旁组织中CD44V6、nm23-H1蛋白的表达和DNA含量进行同步检测,旨在探讨三者与肾癌的发生及其生物学行为之间的关系,以及三者之间的关系。方法:经手术切除并由病理证实的肾癌标本35例,相对应的癌旁组织35例,取正常肾组织5例作为对照。肾癌患者男性27例,女性8例;年龄33~79岁,平均55.4岁;肾癌细胞类型:透明细胞癌24例,颗粒细胞癌3例,混合细胞癌5例,肉瘤样癌3例;临床分期(Robson法):Ⅰ期4例,Ⅱ期20例,Ⅲ期5例,Ⅳ期6例;组织学分级(Fuhrman<WP=4>法):Ⅰ~Ⅱ级26例,Ⅲ级9例;7例有肾或下腔静脉瘤栓(其中Ⅲ期瘤栓5例,Ⅳ期瘤栓2例)。将所有标本制成单细胞悬液,采用间接免疫标记法对癌细胞进行荧光染色后,用流式细胞分析仪分别进行单参数分析,并应用相应的计算机程序软件进行资料处理。CD44V6、nm23-H1蛋白以荧光指数(Fluorescence Index; FI)作为定量表达指标,FI>1.0为阳性表达,FI≤1.0为阴性表达。以DNA指数(DNA Index; DI)表示其相对DNA含量,2倍体及近2倍体DI为1.00±0.15,在此范围之外为异倍体。结果:1. 35例肾癌组织CD44V6蛋白阳性表达率为82.9%,明显高于相对应的癌旁组织14.3%,差异有非常显著性意义(P<0.01)。35例肾癌组织CD44V6蛋白表达FI值(1.10±0.13)明显高于相对应的癌旁组织0.95±0.10,差异有非常显著性意义(P<0.001)。2. 35例肾癌组织nm23-H1蛋白阳性表达率为48.6%,明显低于相对应的癌旁组织91.4%,差异有显著性意义(P<0.05)。35例肾癌组织nm23-H1蛋白表达FI值为1.00±0.09,明显低于相对应的癌旁组织1.09±0.08,差异有非常显著性意义(P<0.001)。3. 35例肾癌组织DNA异倍体率为77.1%,明显高于相对应的癌旁组织14.3%,差异有显著性意义 (P<0.05)。35例肾癌组织DI值为1.28±0.18,明显高于相对应的癌旁组织1.08±0.13,差异有非常显著性意义(P<0.001)。 4. >3cm肾癌患者CD44V6蛋白表达FI值为1.13±0.11,明显高于≤3cm小肾癌患者1.00±0.09,差异有非常显著性意义(P<0.01)。>3cm肾癌患者CD44V6蛋白阳性表达率为92.9%,明显高于≤3cm小肾癌患者42.8%,差异有显著性意义(P<0.05)。Ⅲ~Ⅳ期<WP=5>高分期肾癌患者CD44V6蛋白表达FI值为1.21±0.08,明显高于Ⅰ~Ⅱ期低分期肾癌患者1.05±0.09,差异有非常显著性意义(P<0.001)。静脉瘤栓阳性肾癌患者CD44V6蛋白表达FI值为1.22±0.07,明显高于静脉瘤栓阴性肾癌患者1.07±0.10,差异有非常显著性意义(P<0.01)。远处转移肾癌患者CD44V6蛋白表达FI值为1.23±0.11,明显高于无远处转移肾癌患者1.07±0.10,差异有非常显著性意义(P<0.01)。混合细胞癌和肉瘤样癌CD44V6蛋白表达的FI 值分别为1.23±0.12、1.15±0.06,明显高于透明细胞癌、颗粒细胞癌1.07±0.09、1.03±0.16,差异有非常显著性意义(P<0.01)。CD44V6蛋白在肾癌中的表达与性别、年龄、Fuhrman分级、临床症状无关。5. Ⅲ~Ⅳ期高分期肾癌患者nm23-H1蛋白表达FI值为0.94±0.09,明显低于Ⅰ~Ⅱ期低分期肾癌患者1.06±0.15,差异有显著性意义(P<0.05)。远处转移肾癌患者nm23-H1蛋白表达FI值为0.89±0.04,明显低于无远处转移肾癌患者1.05±0.14,差异有显著性意义(P<0.05)。肾癌患者nm23-H1蛋白表达与性别、年龄、肿瘤大小、Fuhrman分级、细胞类型、临床症状及脉管浸润无关。6. >3cm肾癌患者DI值为1.30±0.19,明显高于≤3cm小肾癌患者1.18±0.06,差异有显著性意义(P<0.05)。>3cm肾癌患者DNA异倍体率为86.4%,明显高于≤3cm小肾癌患者33%,差异有显著性意义(P<0.05)。Ⅲ级肾癌患者DI值为1.47±0.22,明显高于Ⅰ~Ⅱ级肾癌患者1.23±0.14,差异有非常显著性意义(P<0.01)。有症状肾癌患者DI值为1.34±0.21,明显高于无症状偶发肾癌患者1.20±0.08,差异有显著性意义(P<0.05)。肾癌患者DI值及DNA异倍体率与性别、年龄、<WP=6>Robson分期、脉管浸润及远处转移无关。7. CD44V6与nm23-H1蛋白在肾癌中的表达无相关性。CD44V6与DNA异倍体率无相关性,而与细胞增值活性相关。nm23-H1与DNA异倍体率及细胞胞增值活性均无相关性。结论:1. CD44V6的异常高表达参与了肾癌的发生。CD44V6蛋白的表达与肿瘤大小、临床分期、脉管浸润及远处转移显著相关,CD44V6参与了肾癌的演进,特别是与肾癌的脉管浸润及转移扩散行为有一定的关系。检测其基因产物的表达可以成为判断肾癌?