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红藻是海岸潮间带很常见的海洋藻类,特别是大型红藻,跟人类的日常经济生活密切相关。红藻能通过自生代谢,产生一系列具有特殊结构和活性的天然溴化有机物。到目前为止,已发现上千种天然溴化有机化合物并相继报道其具有抗菌、细胞毒性、抗虫等生物活性;同时,科学家发现人工合成的一些溴化物,红藻能够生物合成。本论文通过提取粤东地区红藻中的天然溴化物,在抗菌活性、抗肿瘤活性研究的基础上,筛选出具有特定活性或毒性的组分,并分离纯化。这不但丰富了粤东地区天然溴化有机物的类型并探寻潜在的应用价值,而且因为部分天然溴化物又是人工合成污染物,研究其环境分布、毒性具有重要意义。在我国,对于卤代物的研究主要集中在人工合成以及污染物检测分析方面。至于天然海洋卤化有机物的类型及其生物活性、毒性、生成机制研究方面,我国至今还是空白,对于溴化有机物这一海洋最为丰富的卤代物来说更是如此。同时,粤东地区海藻资源丰富,本研究成果为其应用提供了基础。 本论文人工采集了粤东地区潮间带的11种红藻,分别属于江蓠科(Gracilariaceae)、沙菜科(Hypneaceae)、育叶藻科(Phyllophoraceae)、海膜科(Corynomorphaceae)、松节藻科(Rhodomelaceae)和红毛菜科(Bangiaceae)。以溴化有机物为目标,采用索氏提取的方法,分离得到了11种海藻粗提物。同时,以河弧菌(V. fluvialis)、副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)、气单孢菌属(A. aquariorum)、嗜水气单胞菌(A. hydrophila)、摩氏摩根菌(M. morganii)、金黄色葡萄球菌(S. aureus)和大肠埃希菌(E. coli,ATCC-25922)为受试细菌,采用纸片扩散法研究粗提物的抗菌能力;以肝癌HepG2细胞为受试对象,采用MTT法研究粗提物抗细胞增殖能力,并对活性组分进行分离纯化。 研究发现,所有海藻提取物没有对上述细菌产生抑菌圈。这可能的影响因素是提取方法、受试细菌的类型和采样的时间,获得可靠的结果还需要我们进行深入的研究。凹顶藻提取物对HepG2细胞有较强的细胞毒性,在浓度为8.33μg/mL时,跟对照组比较具有极显著差异(P<0.0001),其它海藻提取物的活性则不明显。查阅文献发现,江蓠科、沙菜科、育叶藻科、海膜科、红毛菜科的提取物的活性研究主要集中在多糖、蛋白及脂肪酸等化合物,没有卤代活性物质的报道。凹顶藻产生多种卤代化合物,且有多样的生物活性。将凹顶藻粗提物进一步分离纯化为5个组分进行活性筛选,其中组分2(正己烷/乙酸乙酯,8/2;67.40%)、组分3(正己烷/乙酸乙酯,1/1;10.06%)具有活性,它们是相继洗脱出的。组分2(5.62μg/mL)具有跟粗提物相似的生物活性,而组分3的活性则比较弱。因此我们对组分2进行了分离纯化,获得了两种潜在的单体化合物,h1和I3,都为无色油状液体,茴香醛染色TLC下分别显紫红色和土黄色。查阅相关文献,我们推断h1和I3可能为倍半萜、二萜或吲哚类化合物,且很可能是卤代化合物。据我们所知,这是首次发现凹顶藻提取物具有抗HepG2增殖活性。