槟榔碱干预后的血管内皮细胞对口腔颊粘膜成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

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目的:该实验通过观察槟榔碱对血管内皮细胞(EC)增殖和分泌NO的影响,及正常血管内皮细胞上清液(ECS)和槟榔碱干预后的血管内皮细胞上清液(AECS)对口腔颊粘膜成纤维细胞(FB)增殖和胶原合成的影响,初步探讨EC在OSF发病中的作用,以进一步了解OSF的病因和发病机制.方法:(1)体外培养血管内皮细胞(EC)和正常人、OSF病人口腔颊粘膜成纤维细胞(NM-FB,OSF-FB).(2)用不同浓度的槟榔碱干预EC,采用MTT比色法检测细胞的增殖状况.(3)收集不同时间点的ECS及经过不同浓度的槟榔碱干预后的AECS,硝酸还原酶法检测ECS、AECS中NO的含量.ECS、AECS干预FB,采用MTT法及羟脯氨酸试剂盒检测FB增殖和胶原合成的状况.结论:(1)一定浓度范围的槟榔碱抑制EC的增殖.去除低浓度槟榔碱短时间干预后,EC增殖能力可恢复,但分泌NO增多,这可能是EC的一种自我保护效应.(2)ECS能促进FB的增殖,存在时效和量效依赖关系.(3)一定浓度范围的槟榔碱抑制NM-FB、OSF-FB的增殖,但此浓度范围的槟榔碱干预后的AECS能促进FB增殖及胶原合成,且AECS较ECS促FB增殖及胶原合成的能力增强.(4)槟榔碱可能通过改变EC的生物活性诱发OSF的发生.
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