人参多糖对肠道微生态及肠黏膜免疫作用的研究

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人参,为五加科植物人参(Panax Ginseng C.A.Meyer)的干燥根,其应用已有千年历史。多糖是人参的重要活性成分之一,具有多种功效,如抗癌、抗氧化、提高免疫力等。目前关于人参总多糖及其子级份对肠道微生态的作用及调节机制还鲜有报道。因此本研究通过两种疾病模型:抗生素相关性腹泻(antibiotic associated diarrhea,AAD)模型和炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)模型,考察人参总多糖及其子级份对肠道微生态的作用及机制。首先,通过水提醇沉,制备水溶性人参总多糖(Water-soluble ginseng polysaccharides,WGP),再通过离子交换层析纯化出两种人参多糖子级份-人参中性糖(Water-soluble ginseng neutral polysaccharides fraction,WGPN)和人参酸性糖(Water-soluble ginseng acidic polysaccharides fraction,WGPA)。WGP、WGPN和WGPA的产率分别为10.2%、7.14%和2.72%。其次,利用盐酸林可霉素灌胃建立AAD小鼠模型,随后给药人参总多糖(WGP)及其子级份(WGPN与WGPA),观察并记录小鼠体重变化、精神状态和腹泻情况。末次给药12 h后,收集小鼠肠道内容物进行16S rRNA高通量测序,并取回肠进行组织学检查。结果表明,与自然恢复组(NR)组小鼠相比,人参多糖及其子级份能够减轻腹泻小鼠症状,改善小鼠回肠组织水肿和炎症情况,增加肠绒毛长度,一定程度上调节小鼠肠道菌群的组成和多样性,增加乳杆菌和链球菌属的相对丰度,其中WGP还能增加乳球菌属的数量。最后,在确定人参多糖及其子级份对肠道菌群失调有效的基础上,本研究又继续考察了其对肠道疾病的影响。利用硫酸葡聚糖钠(Dextran sulfate sodium,DSS)建立IBD大鼠模型,随后给药人参多糖及其子级份。结果表明,人参多糖及其子级份可减轻DSS造成大鼠结肠炎性浸润及组织结构损伤;显著降低结肠中炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17和IFN-γ的表达;降低凋亡蛋白Bax、升高抗凋亡蛋白Bcl-2、紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达水平;提高粪便中有益的阿克曼氏菌、乳酸杆菌等菌属的相对丰度,改善菌群结构及多样性;增加菌群代谢产物短链脂肪酸水平。因此人参多糖及其子级份可显著改善IBD大鼠肠道组织结构损伤、降低炎性反应、保护肠道屏障,并且可以通过富集有益的阿克曼氏菌、乳酸杆菌等,改善肠道菌群失调,并增加短链脂肪酸浓度。人参多糖及其子级份或可作为一种辅助治疗IBD的补充剂。本论文的研究结果可为人参多糖的应用提供基础,为多糖与肠道菌群的互作提供数据支持,也为中药有效成分治疗疾病的机制提供了思路。
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