微生物生物被膜是细菌与物体表面相互作用而形成的膜状结构,这种特殊结构能为细菌提供保护。生物被膜的形成不仅是病原菌对宿主机体致病的关键,也是益生菌被赋予益生活性的重要原因之一。大肠杆菌Nissle 1917（EcN）作为典型的益生菌,不具有免疫原性能够被人体很好的耐受,对多种类型的肠道疾病都具有防治的作用。EcN具有良好的生物被膜形成能力,生物被膜的形成极大的促进了EcN在肠道粘膜中的长期持久性定殖,并且通过竞争作用抑制了宿主体内病原体的定殖。EcN细胞表面的荚膜多糖（Heparosan）是一种酸性多糖,其化学结构与肝素和硫酸乙酰肝素相似。荚膜多糖赋予细菌多种生物活性和功能,能够在细胞壁外形成一层保护层,从而保护细菌免受多种环境压力因素的影响。EcN荚膜多糖合成机制和调控机理比较复杂,EcN荚膜多糖合成基因kfiA的功能至今还未完全诠释,而荚膜多糖似乎与EcN生物被膜的形成有着密切的联系。为了探究荚膜多糖与EcN生物被膜之间的联系,本课题以EcN菌株kfiA基因和EcN荚膜多糖为研究对象,分析kfiA基因以及EcN荚膜多糖对EcN生物被膜的影响。研究结果显示,kfiA基因是合成EcN荚膜多糖的关键基因,kfiA基因的缺失使EcN无法合成荚膜多糖。进一步研究发现,EcN荚膜多糖的缺失使得EcN的等电点升高,促进了EcN对生物大分子的吸附、增强了EcN初期粘附能力以及生物被膜形成能力。EcN荚膜多糖可以被肝素裂解酶Ⅲ分解为不饱和的二糖。为了进一步证明EcN荚膜多糖的缺失可以促进EcN生物被膜形成,本研究利用肝素裂解酶Ⅲ清除了EcN细胞表面的荚膜多糖。结果显示,失去荚膜多糖后,EcN的自聚集能力、初期粘附能力和生物被膜的形成能力显著增强。综上所述,我们得出结论,kfiA基因作为合成EcN荚膜多糖的关键基因,能够影响EcN生物被膜的形成。EcN菌株kfiA基因的缺失,导致荚膜多糖无法合成,这使得EcN的等电点升高,EcN的自聚集能力、初期粘附能力和生物被膜的形成能力得到了增强,促进了EcN生物被膜的形成。