马尾松花粉——我国传统品种花粉，被广泛应用于药品、保健品等领域，具有抗氧化、调节血脂等功能；植物甾醇具有降低机体胆固醇含量的功效，在功能性食品中应用十分广泛，具有很高的应用价值。本论文的主要研究内容如下：研究目的：培养3T3-F442A前脂肪细胞，并对其进行诱导分化，研究马尾松花粉甾醇对3T3-F442A前脂肪细胞增殖、分化及糖代谢的影响，胆固醇、β-谷甾醇分别作为动物来源固醇和植物来源甾醇对照组。通过检测成熟脂肪细胞内AMPK、GLUT1表达含量，试图探究马尾松花粉甾醇影响成熟脂肪细胞糖代谢的内在机制。研究方法：培养3T3-F442A前脂肪细胞，分别在24h、48h和96h后采用MTT检测法检测马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）对3T3-F442A前脂肪细胞增殖的影响；利用胰岛素对3T3-F442A前脂肪细胞进行诱导，分别采用油红O染色、甘油三酯含量测定两种方法来分析马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）对3T3-F442A前脂肪细胞分化的影响；将3T3-F442A前脂肪细胞诱导成功待用，采用MTT检测法检测马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）对3T3-F442A脂肪细胞增殖活性的影响；将3T3-F442A前脂肪细胞诱导成功待用，采用葡萄糖氧化酶法检测马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）对3T3-F442A成熟脂肪细胞葡萄糖消耗量的影响；用酶联免疫检测试剂盒检测成熟脂肪细胞AMPK、GLUT1表达含量。研究结果：（1）培养细胞24h后，松花粉甾醇极显著抑制3T3-F442A前脂肪细胞增殖（P＜0.01），随时间推移抑制效果直线减弱，培养96h后细胞充满板孔，不再呈现抑制效果。2、油红O染色结果显示细胞内出现融环状脂滴，分化的细胞形态变成椭圆形或圆形，随着分化不断进行，细胞内脂滴积累逐渐增加，细胞体积不断增大。马尾松花粉甾醇组与空白对照组相比，起促进分化的作用，且随浓度增加，分化率逐渐提高；胆固醇对照组与空白组相比，起促进分化的作用，且随浓度增加，分化率逐渐提高，分化率较马尾松花粉甾醇组高；β-谷甾醇组亦呈现出促进分化的效果，其中以6.4μg/mL组分化率最高。甘油三酯含量测定结果显示，三种物质都不同程度的增加了3T3-F442A脂肪细胞甘油三酯的含量，其中3.2μg/mL、6.4μg/mL和12.8μg/mL的马尾松花粉甾醇对3T3-F442A脂肪细胞甘油三酯含量有极显著增强作用（P＜0.01），呈剂量依赖。3、用含有马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）的培养基处理成熟3T3-F442A脂肪细胞，MTT法检测各组对成熟脂肪细胞增殖的影响，结果显示处理96h时，6.4μg/mL马尾松花粉甾醇极显著抑制成熟脂肪细胞增殖活性（P＜0.01）。4、用含有马尾松花粉甾醇及对照组（胆固醇和β-谷甾醇）的培养基处理成熟3T3-F442A脂肪细胞，除去24h时6.4μg/mL的胆固醇，其余时间各组均抑制脂肪细胞对葡萄糖的消耗。其中，24h时，0.8μg/mL马尾松花粉甾醇显著抑制脂肪细胞对葡萄糖的消耗（P＜0.05）。5、与空白组相比，3.2μg/mL、6.4μg/mL和12.8μg/mL的马尾松花粉甾醇极显著抑制3T3-F442A成熟脂肪细胞AMPK、GLUT1表达（P＜0.01）。结论：松花粉甾醇对3T3-F442A前脂肪细胞增殖有抑制作用；促进3T3-F442A前脂肪细胞分化；对3T3-F442A成熟脂肪细胞增殖活性、3T3-F442A脂肪细胞糖代谢、AMPK、GLUT1表达均为抑制作用。