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原发性肝癌是严重危害人类身体健康的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤的前三位,故肝癌的放射治疗也受到大众的广泛关注。在临床治疗上,肝癌患者利用放射线可以部分杀死癌细胞,但是,放射线也会波及到周围正常的肝细胞,使正常肝细胞受到放射线的损伤。因此,降低正常细胞辐射敏感性,是人们关注的问题。近年来研究表明,胞膜窖(Caveolae)的标志性结构分子窖蛋白-1(Caveolin-1, Cav-1),除了与多种信号蛋白分子结合,激活或抑制细胞内不同信号通路外,也参与辐射后DNA损伤修复。细胞在经放射线照射后,会造成DNA损伤,Cav-1在DNA损伤修复相关信号通路中均发挥重要的作用,但机制尚不清楚。本实验以人张氏肝细胞株CHL及本实验室前期利用RNA干扰技术建立的Cav-1基因沉默的人张氏肝CHL-CAV7细胞株为研究对象,观察X射线照射对细胞克隆存活率、细胞周期以及DNA损伤修复等相关信号转导蛋白表达的影响,探讨Cav-1与细胞放射敏感性及DNA损伤修复的关系,旨在阐明Cav-1作为细胞膜信号转导平台的标志蛋白在应对细胞放射损伤中的作用,为肝癌放射治疗提供实验依据。结果如下：(1)Cav-1基因沉默增加细胞辐射敏感性。0-10Gy X射线照射后,CHL和CHL-CAV7细胞的克隆存活率减少,CHL-CAV7细胞的克隆存活率在8Gy X射线照射后与母细胞相比显著减少；5Gy X射线照射后,CHL和CHL-CAV7细胞均发生G1期阻滞,CHL-CAV7细胞在X射线照射后G1期阻滞程度高于对照组。(2)Cav-1基因沉默降低细胞DNA损伤修复能力。5Gy X射线照射后,CHL和CHL-CAV7细胞内均有γH2AX蛋白的表达,CHL-CAV7细胞中γH2AX蛋白的表达在照射后15min与母细胞相比显著增多；5Gy X射线照射后,CHL和CHL-CAV7细胞内均有DNA损伤修复相关蛋白p-ATM及DNA-PKcs的表达,CHL-CAV7细胞中p-ATM及DNA-PKcs蛋白的表达在照射后15min与母细胞相比显著减少。(3)Cav-1通过与Mdm2结合介导DNA损伤修复。5Gy X射线照射后,CHL和CHL-CAV7细胞内Cav-1和Mdm2发生结合,CHL-CAV7细胞中Cav-1和Mdm2结合的细胞少于CHL细胞；5Gy X射线照射后,CHL-CAV7细胞内p53蛋白表达降低。结论：Cav-1基因沉默通过p53-Mdm2负性调节增加人张氏肝细胞辐射敏感性,降低DNA损伤修复能力。