枯草芽孢杆菌B11菌株分泌的拮抗物质的纯化及基因文库的构建

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从土壤中分离得到的枯草芽孢杆菌B11菌株对西瓜枯萎病菌有较强的抑制作用,其抑制机制之一是产生拮抗物质。本研究对B11菌株分泌的拮抗物质进行纯化,测定其特性及抑菌机制,并构建B11菌株的基因文库,取得的结果如下: 通过煮沸、DEAE 52阴离子交换层析和氧化铝吸附层析,将B11菌株分泌的两种拮抗物质(拮抗物质A、B)纯化到薄层层析斑点纯。 两种拮抗物质对蛋白酶K和胃蛋白酶稳定,拮抗物质A对胰蛋白酶也稳定,但拮抗物质B对胰蛋白酶部分敏感。这两种拮抗物质均能耐高温,在121℃仍能保持活性不变。 两种拮抗物质对尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveum)、水稻黄单胞菌水稻变种(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)13751菌株、茄青枯拉尔氏菌(Ralstonia solanacearum)P13菌株和水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)均有较强烈的抑制作用,但拮抗物质A对水稻稻灰梨孢菌(Pyricularia grisea)没有抑制作用;而拮抗物质B对水稻稻灰梨孢菌(Pyricularia grisea)有较强烈的抑制作用。处理浓度为4.92μg/mL的拮抗物质A处理尖孢镰刀菌西瓜专化型120h后对菌丝生长的抑制率达
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