Flg22诱导拟南芥钙信号缺失突变体的筛选

来源 :杭州师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stramoniums
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病原菌侵害是影响农作物产量重要因素。植物通过质膜或胞内的受体感受这些生物胁迫的存在,触发下游的信号转导,引发相应的免疫反应以抑制病原体的侵害。而作为植物第二信使的钙信号,在植物感受到胁迫初期就会出现,并对下游信号的传递发挥着重要的作用。Flg22作为一个典型的病原体相关的分子模式,其相关的信号转导机制已经被研究的较为清楚。但对于flg22的诱导如何引起胞内钙离子浓度增加的分子机制依然不清楚。本研究以含有可以稳定遗传水母荧光蛋白(AEQUORIN,AQ)基因的拟南芥EMS诱变体作为材料,通过筛选flg22胁迫下钙离子浓度上升缺失的突变体,期望能够得到flg22诱导的钙信号传导通路中的特异性组分。并且通过克隆相应基因,进一步深入探讨植物感受生物胁迫的机理。目前取得的成果如下:1.通过表型筛选、特异性验证,我们得到了flg22诱导的钙信号缺失的候选突变体;2.我们选取其中一个候选突变体进行回交以及BF3的验证,得到该突变体稳定表达的BF3代,并完成了相应的全基因组重测序,目前正在对突变基因进行定位,并初步将该基因定位于四号染色体上;3.通过对突变体生理表型的分析,我们发现筛选得到的突变体对AtPep1和flg22都不敏感,表明该突变基因可能在植物防御中发挥一定的作用;4.通过荧光定量PCR对flg22诱导下PR1基因表达的检测,我们发现植物在应对病害胁迫时,PR1基因表达量会降低。本研究的顺利进行,将为生物胁迫诱导的早期钙信号,以及采用基因工程方法提高农作物抗病性奠定基础,对进一步进行植物抗病育种以及指导农业生产实践具有重要的作用。
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