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神经前体细胞(Neural Precursor Cells,NPCs)是一种具有自我更新和多向分化能力的原始细胞,在特定因素影响或诱导下能向神经元和胶质细胞分化。深入研究并获得NPCs对神经系统退行性疾病如帕金森病(Parkinson disease, PD)的细胞移植治疗具有应用前景。已有研究发现,移植经诱导分化的多巴胺(Dopamine, DA)能神经元的PD模型大鼠行为学有显著改善。无论如何,找到稳定的体外诱导方法来保证NPCs能够向DA能神经元分化,即做到人为地操纵细胞分化,是有效地将神经干细胞用于PD临床细胞治疗的关键。尽管已经有诸多此类尝试,但目前尚存在不少问题,包括:①尚未找到成熟的方法来诱导NPCs分化成具有合成特异性递质能力的神经元; ②尚不清楚决定前体细胞分化的确切机制; ③体内实验尚不能证明体外实验已经证实的某些诱导分化因素的作用。为探索从NPCs诱导出DA能神经元的新途径,本研究建立了大鼠睾丸Sertoli细胞与大鼠胚胎中脑NPCs的共培养体系,利用Sertoli细胞分泌的各种活性物质来促进NPCs向DA能神经元分化;在此基础上,本研究又以Sertoli细胞表达的DHH基因为切入点,探讨了Sertoli细胞促进前体细胞分化的可能机制。Sertoli 细胞是睾丸中特有的体细胞,对发育中的生精细胞提供营养支持和免疫屏障,并能促进精原细胞分化为成熟的精子。Sertoli 细胞具有活跃的分泌功能,能够分泌100 余种不同的蛋白质,其中许多物质与促进DA 能神经元分化的因子相类似。有实验证实,将Sertoli 细胞与其他组织来源的细胞共培养可以影响这些细胞的生长、发育和分化。本研究将Sertoli 细胞和NPCs 共培养后,可以明显增加NPCs 分化为酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)阳性DA 能神经元的速度和数量。Desert Hedgehog(DHH)是Hedgehog(HH)分泌型信号分子家族的成员之一,该家族除DHH 外,还包括Sonic Hedgehog(SHH)和Indian Hedgehog(IHH)基因,它们分别编码Shh、Ihh 和Dhh 蛋白。DHH 分布