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磷素是植物生长发育所需的大量营养元素之一,对于促进植物的新陈代谢具有重要作用。虽然我国土壤总磷量相当可观,但能被植物直接吸收利用的有效磷含量普遍偏低,土壤缺磷现象严重。农业生产中主要通过施用速效磷肥缓解植物的缺磷症状,但长期施入大量的磷肥会导致土壤的盐渍化,从而阻碍农作物对土壤养分的摄入,加重植物的缺磷症状,不利于绿色农业的可持续发展。研究表明,植物根际有益微生物能够转化难溶性磷,提高植物对磷元素的吸收。木霉菌(Trichoderma spp.)是当前农业生产中最具应用潜力的生防微生物之一,近年来发现,某些木霉菌种具有促进作物生长的特性,如溶磷、产生IAA、嗜铁素及ACC脱氨酶等。但有关木霉菌的溶磷作用及其机制以及对植物抗逆境胁迫能力的影响,目前国内外尚未进行深入研究。本文从实验室已鉴定的生防木霉菌中筛选到一株高溶磷棘孢木霉菌(Trichodermaasperellum),通过研究该菌对不同胁迫因子作用下土壤中可溶性磷的转化以及水培试验,确定了木霉菌转化难溶性有机磷和无机磷对黄瓜幼苗的促生作用;从木霉菌产生磷酸酶和植酸酶的角度研究了木霉菌对难溶性有机磷的转化机制,通过利用纯化的酸性磷酸酶转化难溶性有机磷,分析其对盐胁迫下拟南芥生长的影响,揭示了木霉菌酸性磷酸酶在增强植物抗盐性中的作用。具体结果如下:1、分别采用液体培养法和平板溶磷圈法对本实验室保藏的8株生防木霉菌溶解无机磷和有机磷能力进行比较,筛选出一株高溶磷木霉菌株,编号为棘孢木霉菌Q1(Trichoderma asperellum Q1)。2、研究了接种棘孢木霉菌Q1土壤全磷与有效磷含量的变化情况。结果表明,接种菌株Q1的土壤中有效磷含量明显增加,全磷含量无明显变化,证明了木霉菌Q1能够将土壤中的难溶性磷转化为有效磷。3、通过模拟常见的土壤状况,分析了缺铁、盐胁迫、酸胁迫和碱胁迫因子对棘孢木霉菌Q1及其转化土壤难溶性无机磷(磷酸三钙、磷酸氢钙)和有机磷(植酸钙)的影响,结果表明,盐胁迫对木霉菌转化难溶性磷具有明显的促进作用,而缺铁环境中产生的嗜铁素则缓解了盐胁迫对木霉菌生长的抑制作用。说明木霉菌在缺铁和盐渍化土壤中具有应用潜力。4、为进一步完善棘孢木霉菌Q1溶磷对植物抗盐胁迫能力的影响,本章针对该菌能够通过不同方式转化各种难溶性磷的实验结果,利用水培实验研究了盐胁迫下棘孢木霉菌Q1的溶磷(包括难溶性无机磷和有机磷)作用对黄瓜幼苗生长的影响。结果表明,棘孢木霉菌Q1通过溶解难溶性磷酸盐改善了盐胁迫下黄瓜幼苗的生长状况。5、从棘孢木霉菌Q1产生的磷酸酶和植酸酶入手,研究了木霉菌对难溶性有机磷的转化机制。利用盐析、离子交换层析、凝胶过滤层析从棘孢木霉菌Q1的发酵液中分离得到一种电泳纯的分子量大小约为55kDa的酸性磷酸酶,纯化倍数为9.44倍,回收率为18.9%。利用纯化的酸性磷酸酶对拟南芥进行了平板促生实验,结果表明,添加酸性磷酸酶和难溶性有机磷植酸钙的拟南芥生长状况及根系发育明显好于只添加酸性磷酸酶、只添加植酸钙以及未添加酸性磷酸酶和植酸钙的三个处理,说明酸性磷酸酶对难溶性有机磷植酸钙的转化对促进盐胁迫下植物的生长具有重要作用。