【摘 要】
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目的：研究不饱和脂肪酸制剂鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞的抗肿瘤作用及其机理;进一步阐明经皮瘤内注射鱼肝油酸钠治疗裸鼠皮下移植肝癌的效果和机理,明确该药有无骨髓抑制及
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目的：研究不饱和脂肪酸制剂鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞的抗肿瘤作用及其机理;进一步阐明经皮瘤内注射鱼肝油酸钠治疗裸鼠皮下移植肝癌的效果和机理,明确该药有无骨髓抑制及肝肾功能损伤等副作用.方法：1.选取不同浓度鱼肝油酸钠(200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml和25μg/ml)作用于体外培养BEL-7402人肝癌细胞,分别于加药24、48、72小时后进行酸性磷酸酶法检测细胞活性,测定吸光度值(OD值);另以100μg/ml鱼肝油酸钠作用12小时后,用Annexin-v-FITC试剂盒标记凋亡细胞,进行流式细胞分析计数早期凋亡细胞;或应用甲基绿哌洛宁马休黄(MG-P-MY)组合法进行凋亡细胞染色,并用多功能真彩色计算机图像分析系统(CMIAS)计数凋亡细胞.以培养液和原代培养人成纤维细胞作为空白对照和细胞对照.2. 5周龄裸鼠28只,雌雄各半,于裸鼠的右腋后皮下植入SMMC-7721人肝癌组织块(0.2×0.2×0.2cm<3>).两周后,全部接种部位肿瘤最大径线长至0.28 ~0.96cm,随机分成两组,分别给予鱼肝油酸钠和生理盐水对肿瘤进行局部浸润注射.治疗组以25mg/0.5ml/cm<2>剂量注射,隔两天一次,共三次.对照组按同样方法予相应量的生理盐水.第一次注射后两组各选取4只裸鼠,切取肿瘤组织进行病理组织切片检查,观察瘤体及瘤周血栓形成情况.治疗前后分别测肝、肾功能及白细胞计数.完成注射后两周,对所有动物行病理解剖和组织学检查,明确有无内脏及淋巴结转移和血栓形成.
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