【摘 要】
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卫矛属是一类重要的园林绿化树种,其观赏价值高,是美丽的观叶赏果树种。本研究以从卫矛属植物中筛选出来的12个优良无性系为研究对象,基于叶片转录组数据,进行了EST-SSR标记的检测和开发,并对该12个优良无性系的多样性进行了分析及分子鉴定,构建了DNA指纹图谱;利用电导法和电阻抗图谱法对其中四种具有应用前景的4个无性系(曲叶卫矛、长平叶矛、大叶卫矛、东北金叶卫矛)的抗寒性进行了综合评价;同时研究了曲
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卫矛属是一类重要的园林绿化树种,其观赏价值高,是美丽的观叶赏果树种。本研究以从卫矛属植物中筛选出来的12个优良无性系为研究对象,基于叶片转录组数据,进行了EST-SSR标记的检测和开发,并对该12个优良无性系的多样性进行了分析及分子鉴定,构建了DNA指纹图谱;利用电导法和电阻抗图谱法对其中四种具有应用前景的4个无性系(曲叶卫矛、长平叶矛、大叶卫矛、东北金叶卫矛)的抗寒性进行了综合评价;同时研究了曲叶卫矛、长平叶卫矛、金枝卫矛的嫩枝扦插繁殖,以为该部分卫矛品种的推广应用奠定基础。主要研究结果如下:(1)丝棉木叶片转录组分析表明,在获得的66540条Unigenes序列中,总长度为52510037bp,总共检测到12310个精确型SSR和1024个复合型SSR位点,发生频率分别为18.5%和1.54%。丝棉木的SSR位点类型丰富,单核苷酸至六核苷酸重复类型均有存在。对各组分数量分析表明,单核苷酸重复、二核苷酸重复和三核苷酸重复类型的数量较多,占主导地位,3种类型的SSR位点总数占精确型全部位点的98.50%,说明丝棉木的EST-SSR主要以单、二和三碱基重复单元为主。对所有重复单元的数量进行分析可知,占比例最大的为A/T(6555,53.25%),其次为AG/CT(2200,17.87%)和AT/AT(1173,9.53%)。采用筛选出的6对SSR引物对12个卫矛属无性系进行PCR扩增,宫扩增出39条条带,每对引物扩增条带数在4-9条之间,平均每对引物扩增条带6.5条,每对引物的多态位点百分比均为100%,各引物的多态性信息含量PIC值的变化范围为0.676-0.824。SSR聚类分析可将12个卫矛属无性系分成4类,第一类仅有东北吊蝴蝶1个无性系;第二类为大叶卫矛1个无性系;第三类为邢台金叶卫矛、东北金叶卫矛、曲叶卫矛、长平叶卫矛、本地卫矛、栓翅卫矛等6个无性系;第四类为金边卫矛、普通胶东卫矛、扶芳藤、金枝玉叶等4个无性系。基于SSR扩增结果,构建12个卫矛属植物无性系的DNA指纹图谱及二维码。(2)对4个优良无性系进行抗寒性测定,根据卫矛属各无性系的半致死温度,评价各个无性系的抗寒性。结果表明,曲叶卫矛的抗寒性最强,其次为东北金叶卫矛,次之为大叶卫矛,长平叶卫矛抗寒性最差。各无性系用电导法拟合的半致死温度与胞外电阻率(re)、低频电阻率(r1)拟合的半致死温度的相关系数分别为0.956、0.840,其中电导法与胞外电阻率(re)达到了显著相关水平。这两种方法对抗寒的测定结果基本一致,表明可以用于综合评价卫矛属无性系的抗寒性。(3)以一年生的3种西南卫矛优良无性系(曲叶卫矛、长平叶卫矛、金枝卫矛)为试验材料,采用L9(34)正交试验,开展嫩枝扦插技术研究。结果表明,金枝卫矛采用800mg·L-1 ABT号生根粉在速蘸0.08min时扦插生根率最高,为68.33%;不同的无性系、激素种类和浸蘸时间对西南卫矛的生根率存在极显著差异。金枝卫矛是三个无性系中成活率最高的无性系,长平叶卫矛成活率最低。浸蘸时间对生根影响最大。根数量与根长呈极显著相关。
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