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金针菇(Flammulina filiformis)是一种常见的药食两用真菌。金针菇子实体中含有蛋白质、多糖、甾体类、萜类、多酚类、黄酮类等多种化学成分,具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫、降糖、降血脂、抑菌、抗病毒、提高记忆力、抗炎、保肝护肝等多种药理活性,对阿尔茨海默症、饮食性肥胖症也有一定疗效。本文综述了金针菇的化学成分、药理活性,提取、分离、纯化了金针菇子实体中的化学成分,并对其进行了结构鉴定。
1.不同产地不同品种金针菇品种筛选及提取条件优化收集不同产地不同品种的金针菇子实体共11种,每种金针菇按照料液比(m/v)1∶10浸泡24h,提取液经减压浓缩得到乙醇浸膏,取1g浸膏分散在水中,固相萃取小柱洗脱,条件为:水、40%甲醇、100%甲醇,减压浓缩干燥,精密称取100%甲醇组分20mg配制成20mg·mL-1的甲醇溶液,将供试品溶液进行高效液相分析。色谱条件:流动相为15%-100%甲醇,30min;100%甲醇,30min。进样量为10μL,波长为210nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1。经过谱图分析,福建漳州的千曲T022品种中峰的个数较其他品种多,峰的分离度较好,因此选择福建漳州提供的千曲T022金针菇子实体进行进行化学成分的分离纯化。对金针菇子实体提取条件进行优化,通过对提取方法、提取试剂、提取温度、超声时间等条件的考察,最终确定提取方法为超声后回流提取;提取试剂为95%乙醇、75%乙醇;超声时间为30min;提取温度为80℃;超声次数为3次。
2.金针菇化学成分的系统分离鉴定通过硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、ODS柱色谱法、制备薄层色谱法、半制备高效液相色谱法等多种分离纯化技术,对金针菇不同极性萃取部位进行了分离纯化,共得到16个化合物,结合1H-NMR、13C-NMR、HSQC、COSY、MS等多种光谱共鉴定出11个化合物,分别为麦角甾醇(ergosterol)(1)、(24S)-5α,8α-环氧-24-甲基胆甾-6-烯-3β-醇((24S)-5α,8α-epidioxy-24-methylcholest-6-en-3β-ol)(2)、5α,8α-环氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(5α,8α-epidioxy-6,22-dien-3β-ol)(3)、(22E,24R)-5α,8α-环氧麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇((22E,24R)-5α,8α-epidioxy-6,9(11),22-tien-3β-ol)(4)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)(5)、5α,6α-环氧基-8(14)-烯-3β,7α-二醇(5α,6α-epoxyergost-8(14)-en-3β,7α-diol)(6)、5α,6α-环氧基-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(5α,6α-epoxyergost-8(14),22-dien-3β,7α-diol)(7)、(22E,24R)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7,22-dien-6-one)(8)、(22E,24R)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7-烯-6-酮(3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7-en-6-one)、(9)、烟酰胺(nicotinamide)((10)、尿嘧啶核苷(uridine)(11),其中有5个化合物首次从金针菇中获得。
1.不同产地不同品种金针菇品种筛选及提取条件优化收集不同产地不同品种的金针菇子实体共11种,每种金针菇按照料液比(m/v)1∶10浸泡24h,提取液经减压浓缩得到乙醇浸膏,取1g浸膏分散在水中,固相萃取小柱洗脱,条件为:水、40%甲醇、100%甲醇,减压浓缩干燥,精密称取100%甲醇组分20mg配制成20mg·mL-1的甲醇溶液,将供试品溶液进行高效液相分析。色谱条件:流动相为15%-100%甲醇,30min;100%甲醇,30min。进样量为10μL,波长为210nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1。经过谱图分析,福建漳州的千曲T022品种中峰的个数较其他品种多,峰的分离度较好,因此选择福建漳州提供的千曲T022金针菇子实体进行进行化学成分的分离纯化。对金针菇子实体提取条件进行优化,通过对提取方法、提取试剂、提取温度、超声时间等条件的考察,最终确定提取方法为超声后回流提取;提取试剂为95%乙醇、75%乙醇;超声时间为30min;提取温度为80℃;超声次数为3次。
2.金针菇化学成分的系统分离鉴定通过硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、ODS柱色谱法、制备薄层色谱法、半制备高效液相色谱法等多种分离纯化技术,对金针菇不同极性萃取部位进行了分离纯化,共得到16个化合物,结合1H-NMR、13C-NMR、HSQC、COSY、MS等多种光谱共鉴定出11个化合物,分别为麦角甾醇(ergosterol)(1)、(24S)-5α,8α-环氧-24-甲基胆甾-6-烯-3β-醇((24S)-5α,8α-epidioxy-24-methylcholest-6-en-3β-ol)(2)、5α,8α-环氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(5α,8α-epidioxy-6,22-dien-3β-ol)(3)、(22E,24R)-5α,8α-环氧麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇((22E,24R)-5α,8α-epidioxy-6,9(11),22-tien-3β-ol)(4)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)(5)、5α,6α-环氧基-8(14)-烯-3β,7α-二醇(5α,6α-epoxyergost-8(14)-en-3β,7α-diol)(6)、5α,6α-环氧基-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(5α,6α-epoxyergost-8(14),22-dien-3β,7α-diol)(7)、(22E,24R)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7,22-dien-6-one)(8)、(22E,24R)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7-烯-6-酮(3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7-en-6-one)、(9)、烟酰胺(nicotinamide)((10)、尿嘧啶核苷(uridine)(11),其中有5个化合物首次从金针菇中获得。