【摘 要】
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目的 血栓等心血管类疾病是目前世界范围内发病率和死亡率极高的疾病,抗血小板聚集对于血栓等疾病的治疗具有积极的意义,蛇毒小分子肽类物质具有很好的抗血小板聚集作用,因此我们拟从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到小肽类物质,进一步研究其在抗血小板聚集方面的药理作用。方法①用乙醇、葡聚糖凝胶G50粗分和多次反相高效液相分离纯化,得到蛇毒小肽后用质谱核磁谱对分离物质进行鉴定;②比浊法进行体外人血血小板聚集实验,检测
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目的 血栓等心血管类疾病是目前世界范围内发病率和死亡率极高的疾病,抗血小板聚集对于血栓等疾病的治疗具有积极的意义,蛇毒小分子肽类物质具有很好的抗血小板聚集作用,因此我们拟从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到小肽类物质,进一步研究其在抗血小板聚集方面的药理作用。方法①用乙醇、葡聚糖凝胶G50粗分和多次反相高效液相分离纯化,得到蛇毒小肽后用质谱核磁谱对分离物质进行鉴定;②比浊法进行体外人血血小板聚集实验,检测蛇毒小肽对血小板聚集的影响;③用ADP诱导小鼠产生急性肺血栓,通过预防给药,测定蛇毒小肽对于ADP诱导的急性肺血栓小鼠的保护作用,主要检测其对于小鼠呼吸喘促时间、外周血小板数目和肺组织微血栓形成的影响;④高效液相法测量蛇毒小肽对于血管紧张素转化酶（ACE）的抑制作用;⑤小鼠断尾实验检测蛇毒小肽的出血风险。结果①通过分离纯化和鉴定,从尖吻蝮蛇蛇毒中得到两个小肽,并命名为肽A和肽B,分子量分别为429Da和443Da,氨基酸序列分别为焦谷氨酸-天冬氨酰-色氨酸和焦谷氨酸-谷氨酰胺-色氨酸;②比浊法测量得到肽A和肽B对人血小板聚集的半数抑制浓度分别为66 μ M和203 μ M;③体内试验证实肽A和肽B均具有减少小鼠呼吸喘促时间,10mg/kg肽A和20mg/kg肽B可以显著性地减少小鼠呼吸喘促时间;10mg/kg肽A和40mg/kg肽B具有防止小鼠肺内微血栓形成的作用;肽A10mg/kg和肽B 80mg/kg可以使得小鼠的血小板数目保持在正常范围内;④肽A和肽B具有弱的抑制血管紧张素转化酶活性的作用,它们的半数抑制浓度分别为0.34mM和1.08mM;⑤40mg/kg肽A和40mg/kg肽B均没有显著性地增加出血的作用。结论 尖吻蝮蛇蛇毒肽A和肽B具有体外抗血小板聚集和体内预防血栓形成的作用,且肽A作用显著性地高于肽B;这种防血栓形成可能与其抗血小板聚集作用相关;肽A和肽B几乎不具有出血倾向,具有较高的潜在开发价值。
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