【摘 要】
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背景:肝癌患者死亡率高和临床预后较差的主要原因是大多数患者在确诊时已发生转移。在前期研究中,我们利用iTRAQ技术发现高转移潜能肝癌细胞株与低转移潜能的细胞株相比,PLEC
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背景:肝癌患者死亡率高和临床预后较差的主要原因是大多数患者在确诊时已发生转移。在前期研究中,我们利用iTRAQ技术发现高转移潜能肝癌细胞株与低转移潜能的细胞株相比,PLEC呈高表达。对95例肝细胞肝癌(HCC)癌组织和癌旁组织进行免疫组化分析,发现PLEC的过表达与TNM分期和肿瘤大小密切相关,提示PLEC可能与肝细胞癌的发生发展、转移和预后相关。目的:通过体内外实验探索PLEC对肝癌细胞株生物学行为的影响,以期为肝癌的预防、预后及治疗提供新的靶点。方法:1、通过慢病毒为载体的RNA干扰技术构建PLEC稳定敲减细胞株并进行鉴定。2、评估PLEC对肝癌体外生物学行为的影响。包括细胞划痕实验、侵袭实验、细胞周期检测、细胞凋亡检测、细胞增殖,所有实验均独立重复3次。3、评估PLEC对MHCC97-H体内生物学行为的影响。通过建立裸鼠肝原位异种接种模型,观察对成瘤能力、转移侵袭能力的影响。取肺和肝叶做连续切片,HE染色观察是否有转移灶。结果:1.敲低PLEC的表达对MHCC97-H细胞的周期、增殖、凋亡、迁移、侵袭等体外生物学行为无显著影响(P>0.05)。裸鼠体内肝原位接种肿瘤模型构建成功,各实验组成瘤率均为100%。肺和肝组织切片未见微小转移灶,但与文献报道MHCC97-H细胞株的100%肺转移潜能实况不符,该实验结果的真实性有待验证。2.SMMC-7721细胞株作为研究对象,一系列体外实验结果表明敲低PLEC表达能显著抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移侵袭能力。结论:PLEC可能促进了肝癌细胞增殖、转移侵袭能力,是肝细胞癌潜在治疗靶点之一,前期免疫组化结果也提示PLEC可作为肝癌转移的潜在指标,具有较大的研究价值。
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