急性乙醇干预对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白表达的影响

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背景:  急性乙醇中毒可能导致既往无心脏病史的健康人出现房颤等严重的急性心律失常。本研究意在明确急性乙醇干预对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白表达的影响,并探讨该通道在急性乙醇中毒引发心律失常的过程中所发挥的效应。  方法:  1.新生SD大鼠原代心房肌细胞的培养及鉴定。  2.采用CCK-8法检测乙醇干预24h导致新生SD大鼠原代心房肌细胞凋亡所需的浓度。  3.建立以最大非凋亡浓度及最小凋亡浓度的乙醇干预24h的新生SD大鼠原代心房肌细胞模型。  4.采用Westernblot法检测新生SD大鼠原代心房肌细胞Kir3.1蛋白的表达情况。  5.计量资料采用均数±标准差((x)±S)表示,应用SPSS17.0统计软件分析。组间差异比较采用单因素方差分析,P<0.05提示有统计学差异。  实验结果:  1.成功培养新生SD大鼠原代心房肌细胞,细胞免疫荧光鉴定所培养细胞为心肌细胞,且90%以上细胞肌钙蛋白Ⅰ染色阳性。  2.CCK-8法测定显示200mmol/L的乙醇干预24h不会导致心房肌细胞凋亡,而400mmol/L以上的乙醇干预可以导致心肌细胞凋亡。  3.Western-blot检测显示200mmol/L及400mmol/L的乙醇干预24h均导致新生SD大鼠原代房心肌细胞Kir3.1蛋白表达明显上调(P<0.01),而200mmol/L与400mmol/L乙醇干预二组之间Kir3.1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。  结论:  急性乙醇干预能够明显上调乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白的表达,其机制与乙醇所致细胞凋亡无直接关系。
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