烟草黑胫病是烟草生产上最具毁灭性的病害之一,可以危害烤烟、晾烟、晒烟、白肋烟、香料烟等所有栽培烟草,对烟草业造成了巨大经济损失。此病的致病菌是烟草疫霉菌,是一种喜高温、高湿的兼性寄生真菌,其菌丝体、卵孢子及厚垣孢子可在遗落土壤或混杂堆肥中的植株残余组织上越冬,是一种典型的土壤寄居菌,可以在烟草生长季节侵染烟草引起病害,当烟草收割以后,病菌又以不同形式转入土壤中生存,有文献报道在无烟草存在的土壤中,该菌可存活5年或更长,在风干土中,亦可存活18个月之久快速地明确土壤中烟草疫霉菌的活菌数量,有助于了解土壤中烟草疫霉菌的分布和密度,对预测烟草疫霉菌的发生动态、及时发布灾情预报具有重要意义。土壤中疫霉菌数量与烟草黑胫病发生成正相关,因此建立一种快速简便的计数方法有助于预测灾情和减少损失。将稀释平板法、选择性培养基、微量真菌DNA提取及定性PCR相结合,建立一种土壤烟草疫霉菌快速计数方法。结果表明：10-2稀释浓度和选择性培养基能很好抑制绝大多非疫霉菌和所有细菌生长,有利于对土壤中烟草疫霉菌进行分离计数；微量真菌DNA提取方法提取的菌落DNA能够满足定性PCR的要求,采用的特异引物只能从疫霉菌中扩增到737bp的特异性片段；利用真菌ITS验证了该方法确定的6个土壤烟草疫霉菌与已报道烟草疫霉菌相似度达99%以上；表明该方法完全适宜于土壤中烟草疫霉菌数量的鉴定及计数,具有相对准确、低成本、简单易推广的优点。硼是高等植物正常生长必需的微量元素之一,目前已有的研究发现,提高植物组织中硼元素的含量可以增强植物对某些病害的抗性；另有一些研究发现硼对病原菌也产生直接的影响。本文研究了硼酸钠对烟草疫霉菌生长的影响。研究结果表明,随着硼浓度的提高,烟草疫霉菌孢子囊的产量以及孢子囊的释放率都显著下降。单因素方差分析结果表明,几个硼浓度处理与对照之间都达到极显著差异(0.01)；0.1mM的硼就可以极显著地抑制烟草疫霉菌孢子囊的产生以及释放；对烟草疫霉菌孢子的萌发亦有抑制作用,但抑制作用不强,主要是减缓了孢子萌发的速度。8mM以上的硼浓度就可以显著抑制烟草疫霉菌菌丝的扩展；液体培养基中,当硼浓度低于12mmM时,烟草疫霉菌的菌丝干重随硼浓度的升高而增加,当硼浓度大于12mM时,菌丝干重随硼浓度的升高而减少。8mM、12mM、16mM硼浓度处理对胞内蛋白的表达没有明显影响,但对胞外蛋白的表达却有明显影响；在8mM、12mM的硼浓度处理下,烟草疫霉菌的菌丝体干重的增加可能与胞外蛋白的表达差异有关,暗示高浓度的硼可能会促进烟草疫霉菌的生长,即高浓度和低浓度的硼处理,可能存在不同的影响机制。