论文部分内容阅读
目的:1、探讨原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis,PBC)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)基因分型与生化指标相关性。2、了解扬州地区健康体检人群血清抗M2型线粒体抗体(anti-mitochondrial antibody type M2,AMA-M2)阳性率,对阳性受检者的各项检测结果进行统计学分析,评价AMA-M2对PBC早期筛查的价值。方法:1、结合本课题组前期PBC患者全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)结果及文献报道的东西方人群与PBC发病相关的SNP位点,遴选出25个SNP候选基因位点,应用飞行时间质谱法对53例PBC患者及59例健康对照进一步验证相关位点的多态性,探讨不同SNP基因型与血清生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酸转移酶、总胆红素、直接胆红素、白蛋白与总蛋白)的相关性。2、应用自建AMA-M2抗体ELISA检测方法(包含3个主要靶抗原:丙酮酸脱氢酶复合体E2(PDC-E2)、侧链二氧酸脱氢酶复合体E2(BCOADC-E2)及2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)的部分区域),对2017年11月至2019年8月江苏省苏北人民医院25713例健康体检者血清AMA-M2进行检测,同时收集阳性受试者的一般资料、临床表现、血清生化指标进行统计学分析。结果:1、对53例PBC患者及59例健康对照进行相关位点的多态分析发现:(1)STAT4基因rs10168266位点在PBC组与健康对照组间SNP基因型分布及等位基因频率比较均有统计学意义(P=0.008,0.017),该位点rs10168266 T等位基因可能是PBC发生的风险因素(OR=1.992,95%CI=1.134-3.498);(2)IL21基因rs17005934位点在两组间SNP基因型分布及等位基因频率比较均有统计学意义(P=0.018,0.004),该位点rs17005934 C等位基因可能是PBC发生的风险因素(OR=2.300,95%CI=1.321-4.002);(3)IL21基因rs925550位点在两组间SNP基因型分布及等位基因频率比较均有统计学意义(P=0.004,0.001),该位点rs925550 A等位基因可能是PBC发生的危险因素(OR=2.582,95%CI=1.494-4.472);(4)TNFSF15基因rs4979462位点在两组间SNP基因型分布及等位基因频率比较均有统计学意义(P=0.001,0.000),该位点rs4979462 T等位基因可能是PBC发生的危险因素(OR=3.167,95%CI=0.174-0.573);(5)TNFSF8基因rs2295800位点在两组间SNP基因型分布及等位基因频率比较均有统计学意义(P=0.027,0.011),该位点rs2295800 C等位基因可能是PBC发生的危险因素(OR=2.091,95%CI=0.273-0.836);(6)IKZF3基因rs9635726位点在两组间SNP基因型分布比较无统计学意义(P=0.179),但两组间等位基因频率比较有统计学意义(P=0.036),该位点rs9635726 C等位基因可能是PBC发生的危险因素(OR=1.828,95%CI=1.047～3.192)。2、SNP基因分型与PBC患者血清生化指标方差分析结果:(1)IL21基因rs17005934、rs925550位点的SNP各基因型(TT、TC、CC;CC、CA、AA)之间谷丙转氨酶(ALT)表达水平(45.26±23.62、82.03±59.06、234.16±359.62;84.34±64.55、52.16±36.15、216.71±327.36 U/L)存在统计学意义(P=0.039,0.045);(2)STAT4基因rs10168266位点的SNP各基因型(CC、CT、TT)之间直接胆红素(DBIL)表达水平(12.90±19.44、13.85±19.08、42.06±38.91μmol/L)存在统计学意义(P=0.022)。3、对25713例健康体检者筛查中发现86例AMA-M2阳性,阳性率为0.334%,女性阳性率(0.421%)高于男性(0.258%),且差异有统计学意义(P<0.05)。AMA-M2阳性者平均年龄53.12±17.10岁,按年龄分4组,分别为<30岁组、30～45岁组、46～60岁组以及>60岁组,阳性率分别为0.297%、0.190%、0.316%和0.639%。随年龄的增大,AMA-M2阳性率比例有增高的趋势,>60岁年龄组阳性率最高,与另外三组差异有统计学意义(P<0.05)。另外我们发现在86例AMA-M2阳性受试者中有3例其碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酸转移酶(GGT)增高,并且均无PBC相关临床表现。结论:1、STAT4基因rs10168266、IL21基因rs17005934和rs925550、TNFSF15基因rs4979462、TNFSF8基因rs2295800以及IKZF3基因rs9635726为PBC相关易感位点,进一步验证了这些位点多态性与PBC的发病有关。2、STAT4基因rs10168266 T、IL21基因rs17005934 C、IL21基因rs925550 A、TNFSF15基因rs4979462 T、TNFSF8基因rs2295800 C、IKZF3基因rs9635726 C等位基因可增加PBC的发病风险。3、IL21基因rs17005934与rs925550位点SNP基因型与PBC患者ALT水平相关。STAT4基因rs10168266位点SNP基因型与PBC患者DBIL水平相关。4、扬州地区AMA-M2阳性率为0.334%,女性阳性率(0.421%)高于男性(0.258%),并且随着年龄增长AMA-M2阳性率有增高的趋势。5、抗M2型线粒体抗体筛查可早期发现健康体检PBC患者,为预防和治疗早期PBC患者提供临床思路。