1 目的 随着社会的发展和人们生活节奏的加快，许多与结肠运动功能障碍相关疾病的发病率有增加的趋势。结肠运动障碍性疾病逐渐引起人们的重视。结肠不参与重要的食物消化过程，其主要生理功能体现在结肠的运动方面。因此，结肠运动及其调控成为人们研究结肠运动障碍性疾病的重点。结肠分布有丰富的神经丛。外在神经丛主要有交感神经和副交感神经丛。内在神经丛则主要由粘膜下神经丛，肌间神经丛和浆膜下神经丛构成了ENS。ENS具有相对的独立性。结肠运动主要由肠神经系统(ENS)调控。现已证实ENS神经元合成的胃肠激素有胃泌素(Gastrin)、血管活性肠肽(VIP)、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素(SS)、神经降压素(NT)，P物质(SP)和脑啡肽等二十余种。从对结肠运动影响的角度，胃肠激素可分为兴奋性和抑制性两类。兴奋性脑肠肽主要有SP，SS等。抑制性胃肠激素主要有VIP，垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)等。因此，上述胃肠激素代表ENS影响结肠运动的主要调节路径。自胃肠激素的途径研究调控结肠运动无疑具有重要的理论和现实意义。 在数千年的历史发展过程中，中医学在理论和临床各科疾病的治疗方面都取得了长足的发展。脾胃学说是中医理论的一个重要的组成部分。由于历史条件所限，中医经典脾胃理论虽然对结肠功能及其调节没有直接认识。但对脾胃肠腑的运化已有详细的论述。在脾胃理论的指导下，应用中药治疗胃肠病的良好效果更是在世界范围内获得广泛认同。近年，随着世界中医热的兴起，从临床有效的中药中寻找新的活性成分，探索新药是一个大的趋势。白芍是一味养阴柔肝的常用中药，但不少文献报道其对调节结肠运动具有显著性的作用。刘洪明等在临床工作中发现重用白芍可治疗便秘。覃俊佳等报道白芍可直接作用于结肠，促进回肠 南京医科大学硕士学位论文 和结肠的运动，可能兴奋胆碱能受体及阻断卜受体。也有学者 实验研究发现甘草和白芍合用可增强兔在体肠管运动。在现有研”究的基础上，探讨白芍是否通过调节脑肠肽的途径影响结肠运动 不仅对于阐明白芍的作用机理，更重要的是对于研究开发胃肠动 力的新型药物有重要的意义。 分析前人研究报道，我们提出了白芍可能通过作用于脑肠肽 而调节结肠运动的假设。本研究在中医理论指导下，结合国内外 脑肠肽调节结肠运动的研究成果，运用先进的实验手段探索白芍 的总提取物一白芍总武是否对离体豚鼠结肠平滑肌肌条的运动 具有作用及其对结肠平滑肌中脑肠肽调节物的影响；从器官到细 胞水平探讨白芍调节结肠运动的机制，从而为开发白芍及肠动力 中药提供理论基础和研究模式的尝试。 2材料与方法 2＊ 材料 二．1＊动物 Hartley系豚鼠28 ．q，体重400一5009，雌雄各半， 普通级健康动物，购自江苏省实验动物中心。 2．1．2药物 白芍总威由深圳南方制药厂惠赠，制备成25％溶液 备用。0．sing／ffil硫酸阿托品注射液，武汉制药厂队ot．001941）。 氯（ 乙酞胆碱（Ach），上海试齐三厂，配制成 l．0 XIO”’mol／l 溶液备用。5．羟色胺硫酸肌酚门－HT），中国医药公司上海化学 采购站，配制成 1．0 X 10“mol／l溶液备用。乳酸红霉素，大连美 罗大药厂，LoiN．20010202，用 5％葡萄糖溶液配制成 100mg／ffil溶－液备用。号2．l．3试剂 兔抗肥、兔抗＊P、及免疫组｛匕试剂盒购自武汉博 士德公司。 2．1．4仪器 微量多导离体器官水平浴槽及配套器材，由日本国立 生理学研究所实验动物中。。尾崎毅教授提供。Doctor习5 Super Lab．微机化生理药理实验系统，购自于江苏生物医学工程学会医 2 南京医料大学硕士学位论文 学电子技术研究所。 2．2 实验方法 2．2．ITGP对豚鼠结肠平滑肌离体肌条的作用 动物购进且适应 性饲养1周后。每次取豚鼠 IR，禁食不禁水24h，颈椎脱臼处 死，自肛门上 Icm处取长约 15c＊结肠，轻柔洗净，剪成小段置 于 4C台氏液中，通 95％O叶5％CO。备用。沿肠系膜剪开，取肠 系膜对侧结肠纵肌肌条门mn仆 mm）；横肌肌条则与肠管纵行 方向垂直剪开取横肌中间段，同样为 7mm XI mm。月几条一端以 非弹性细丝固定于浴槽中，一端与张力换能器相连。以 3ml／min 64流速持续灌流台氏液并通95％O广5％COh施加 500mg预初张 力，平衡60min，以结肠无或仅有轻微自律性收缩为平衡标准。 平衡后，滴加试剂于浴槽中并在观察效应期间暂停灌流台氏液