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背景与目的:反左金丸(Retro-zuojin Pill,RZP)是受左金丸(Zuojin Pill,ZP)启发而创制的,由吴茱萸黄连药对按照6∶1的比例配伍组成。现代药理学研究表明,反左金丸针对消化系统疾病具有抗炎抑菌、抗溃疡、镇痛等作用;在抗肿瘤方面小檗碱(Berberine,BBR)和吴茱萸碱(Evodiamine,Evo)均可阻断促癌物质对潜在癌变细胞的激活从而发挥抗肿瘤作用。奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)是目前临床上治疗结肠肿瘤最常见的有效化疗药物,但在临床应用L-OHP过程中发现易引起消化道毒副反应及耐药,影响结肠癌患者术后康复效果。近年来大量中西医结合治疗结肠癌的临床表明,结肠癌患者术后,中药协同化疗靶向药物治疗结肠癌不仅可以有效缓解放化疗过程引起的消化道毒副作用,还可通过提高机体的免疫力达到抗癌复发转移的作用。因此对不同浓度的反左金丸及合用L-OHP作用于结肠癌裸鼠进行实验研究,以期探索出有效的中西医联合治疗方案,为临床结肠癌患者的治疗提供一些新的诊疗思路。目的:本实验的目的是观察不同浓度反左金丸及合用L-OHP作用于人结肠癌SW480细胞荷瘤裸鼠后IL-2、IL-10和NF-κB p65表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:收集对数生长期人结肠癌SW480细胞,调整其浓度为5.5×10~6的细胞悬液,0.2ml/只接种于5只裸鼠腋下造模,观察裸鼠肿瘤生长情况,待瘤体直径长至1.0cm左右,选择无破溃且肿瘤生长较好的裸鼠作为供瘤鼠。台盼蓝染色,选取活性较好的肿瘤组织,用培养基冲洗干净,剪成2 mm~3左右的组织块接种60只裸鼠右侧腋下。待肿瘤长至100 mm~3左右随机分为6组,每组10只,即空白对照组(单纯肿瘤模型组),阳性对照(L-OHP)组,反左金丸低剂量组,反左金丸高剂量组,反左金丸低剂量+L-OHP组,反左金丸高剂量+L-OHP组。然后连续给药干预4周,间隔固定时间测量裸鼠的体重、肿瘤体积,停药后次日摘眼球采血ELISA试剂盒测定IL-2和IL-10水平,处死裸鼠取瘤组织和称重,计算抑瘤率,NF-κB p65的表达水平用免疫组织化学法检测。结果:1、实验各组:空白对照组,L-OHP组,反左金丸低剂量组,反左金丸高剂量组,反左金丸低剂量+L-OHP组,反左金丸高剂量+L-OHP组的平均瘤体积分别为:1208±41.11mm~3;831.3±38.82mm~3;998.5±18.54mm~3;906.7±4.989mm~3;489±16.33mm~3;307±15mm~3。与空白对照组比较,L-OHP组、反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组、反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组裸鼠肿瘤体积明显缩小(p<0.05);与L-OHP组比较,反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组裸鼠肿瘤体积明显偏大但无统计学意义(p>0.05),而反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组裸鼠肿瘤体积明显缩小(p<0.05);与反左金丸低剂量组相比较,反左金丸低剂量+L-OHP组裸鼠肿瘤体积明显缩小(p<0.05);与反左金丸高剂量相比,反左金丸高剂量+L-OHP组裸鼠肿瘤体积明显缩小(p<0.05)。相比于空白对照组比较,L-OHP组,反左金丸低剂量组,反左金丸高剂量组,反左金丸低剂量+L-OHP组,反左金丸高剂量+L-OHP组各组抑瘤率分别为:31.2%、17.4%、25.0%、59.5%、74.5%,各组间的差异均有统计学意义(p<0.05)。2、ELISA的结果显示:实验各组IL-10均值为:68.95±4.691,35.81±2.909,36.53±3.259,38.69±5.384,53.55±2.956,66.25±5.489;实验各组IL-2均值分别为:27.78±3.149,56.59±5.064,48.6±2.837,43.8±1.978,34.58±2.584,29.94±1.544。与空白对照组比较,L-OHP组、反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组的IL-10水平均下降、IL-2水平升高,差异有统计学意义(p<0.05),但反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组IL-10水平下降、IL-2水平升高,差异统计学无意义(p>0.05);与L-OHP组比较,反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组IL-10水平升高、IL-2水平下降,但差异统计学无意义(p>0.05);但和反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组IL-10水平升高、IL-2水平下降,组间的差异均有统计学意义(p<0.05),且和反左金丸的浓度成正比关系。3、免疫组化染色的结果显示:与空白对照组比较,L-OHP组、反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组、反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组NF-κB p65表达水平明显下降;与阳性对照组比较,反左金丸低剂量组、反左金丸高剂量组NF-κB p65表达水平升高,但反左金丸低剂量+L-OHP组、反左金丸高剂量+L-OHP组NF-κB p65表达水平明显下降。4、结论:不同浓度反左金丸及合用L-OHP对结肠癌SW480细胞荷瘤裸鼠有明显的抑瘤作用,其作用机制可能是通过阻断NF-κB p65的激活抑制促炎因子IL-2生成、促进抑炎因子IL-10分泌,从而发挥作用。