烟叶致香前体物高效分析方法研究

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烟叶是一种重要的经济作物,其色素、多酚及有机酸等致香前体物含量的高低在卷烟香气质和量中起着重要作用。现行烟草行业标准方法YC/T 382-2010、YC/T202-2006和常规非挥发性有机酸提取方法分别采用90%丙酮、50%甲醇和甲醇提取烤烟中的色素、多酚和非挥发性有机酸,由于只提取了1次,导致烟叶中的主要致香前体物的测定结果偏低。本论文以溶剂极性递增法提取烟叶中的色素、多酚及非挥发性有机酸,再采用高效液相色谱法进行测定,旨在使烤烟中的色素、多酚及非挥发性有机酸能同时被提取得更加完全,使测定值更加接近真实值,为烟叶品质鉴定提供参考。结果如下:(1)以正己烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水为溶剂,采用溶剂极性递增法提取烟叶中的致香前体物,并与现行提取色素、多酚的烟叶行业标准方法以及常规非挥发性有机酸的提取方法进行比较。结果表明,采用溶剂极性递增法提取的烟叶色素和多酚均高于现行行业标准方法,非挥发性有机酸高于常规非挥发性有机酸的提取方法。以云烟105中部叶为例,溶剂极性递增法提取的叶黄素和β-胡萝卜素总量分别比行业标准方法高24.6%和455.5%,绿原酸和芸香苷总量分别比比行业标准方法高10.6%和15.9%,而草酸、苹果酸和柠檬酸总量则分别比常规非挥发性有机酸提取方法高25.0%、30.0%和28.6%,说明采用溶剂极性递增法比现行行业标准方法和常规非挥发性有机酸提取方法更适于提取烟叶色素、多酚和非挥发性有机酸。(2)在溶剂极性递增法中,云烟105、G80和云烟87的正己烷和氯仿提取物中能检测出叶黄素和β-胡萝卜素,而乙酸乙酯、丙酮、乙醇及水提取物中均未检测出叶黄素和β-胡萝卜素,因此烟叶中的色素只需用正己烷和氯仿提取即可。溶剂极性递增法提取叶黄素和β-胡萝卜素的回收率分别在96.3%~102.6%和95.8%~104.4%之间,相对标准偏差均小于5%,说明以该方法提取测定烟叶中主要色素的准确度和精密度较高。(3)六种提取物中均能检测出绿原酸和芸香苷,但正己烷提取出的绿原酸和芸香苷很少,对云烟105、G80和云烟87的C3F而言,正己烷提取的绿原酸分别只占溶剂极性递增法提取总量的0.10%、0.19%和0.28%,芸香苷也只分别占提取总量的0.08%、0.08%和0.31%,因此烟叶中的多酚可以依次采用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水进行极性梯度法提取。溶剂极性递增法提取绿原酸和芸香苷的回收率分别在97.1%~115.0%和92.7%~105.2%之间,相对标准偏差均小于10%,说明以该方法提取测定烟叶中主要多酚类致香前体物的准确度和精密度较高。(4)溶剂极性递增法提取云烟105 C3F的非挥发性有机酸时,正己烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水提取出的草酸分别占溶剂极性递增法提取总量的0.79%、29.82%、7.93%、13.84%、20.64%和27.31%;氯仿、乙酸乙酯和乙醇提取出的苹果酸则分别占了6种溶剂极性递增法提取总量的15.43%、59.10%和25.12%,而正己烷、丙酮和水提取出的苹果酸合量只占了总量的0.35%;丙酮、乙醇和水提取物中的柠檬酸分别为6种溶剂极性递增法提取总量的20.19%、56.14%和23.42%,因此烟叶中的有机酸也不需正己烷,而只需用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水进行溶剂极性递增法提取。溶剂极性递增法中有机酸的回收率为92.5%~108.7%,相对标准偏差小于5.2%,说明以该方法提取测定烟叶中主要非挥发性有机酸的准确度和精密度也比较高。
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