红海滩嗜碱放线菌分离鉴定及生物学活性研究

来源 :沈阳师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:huangxl2000
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辽宁盘锦红海滩是生长有旺盛碱蓬草的浅海滩涂盐碱地,这种独特恶劣的自然环境蕴育着多样丰富、功能特殊的极端环境微生物资源,为我们提供了研究极端环境微生物的良好场所。极端环境微生物(包括嗜碱放线菌)在长期的生存选择压力下,演化并具有适应环境胁迫的功能基因、特殊结构和代谢产物,是发现新种、极端酶和新颖结构活性产物的重要研究材料,具有重要的研究基础和开发利用价值。本研究从辽宁盘锦的红海滩土样中分离得到42株可培养嗜碱放线菌,采用形态学观察和分子生物学鉴定相结合的方法对其中的10株进行鉴定;通过酶活检测和抑菌活性分析,筛选得到活性较强的HHT-6菌株。以该菌株为实验菌株,测定其生理生化特征、生长曲线,并通过单因子实验和正交实验测定HHT-6菌株最佳发酵培养基和培养条件,主要研究结果如下:1.从辽宁盘锦红海滩土样中分离得到42株嗜碱放线菌,对其中10株进行形态学观察和分子生物学鉴定,确定分属于诺卡氏菌属和链霉菌属;2.酶活检测表明:在42株嗜碱放线菌中,具有产淀粉酶活性的菌株为15株,产纤维素酶活性的菌株为7株,产蛋白酶活性的菌株为14株,产过氧化氢酶活性的菌株为17株;42株嗜碱放线菌均不具有产脂肪酶和几丁质酶活性;3.抑菌活性研究表明:在42株嗜碱放线菌中,仅有7株对四链球菌有抑菌作用,其中HHT-24抑菌圈半径可达8mm;HHT-14对枯草芽孢杆菌抑菌半径达5mm;42株嗜碱放线菌对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌均无抑菌作用。植物病原菌拮抗试验表明,在42株嗜碱放线菌中,只有14株对不同植物病原菌有抑制作用,HHT-6菌株对番茄灰霉病菌、向日葵核盘菌、玉米大斑0#、玉米大斑1#、玉米大斑2#,五种植物病原菌均有抑菌作用,其中对向日葵核盘菌的抑菌率可达80.79%。4.生理生化实验表明:HHT-6菌株对麦芽糖利用率最高,对半乳糖利用率最低;明胶液化阳性;纤维素水解阳性;硫化氢反应阴性;硝酸盐还原阴性,具牛奶胨化能力;不产生黑色素。5.单因子试验和正交试验结果表明:HHT-6菌株最佳培养基配方:麦芽糖3%,硝酸钠0.15%,氯化钠0.025%,磷酸氢二钾0.075%,硫酸镁0.075%,氯化亚铁0.001%;最优培养条件:初始pH 10.0,装液量为50%,120rpm发酵192h;最高耐盐量为5%。
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