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文昌鱼为脊椎动物和尾索动物祖先的现存代表,是探索早期脊索动物原生殖细胞起源和演化的关键性实验动物。本研究以白氏文昌鱼为实验材料,以参与原生殖细胞发育和分化的Vasa和Nanos基因为分子标志,阐明了原生殖细胞的起源和迁移模式。本研究克隆了白氏文昌鱼Vasa和Nanos同源基因,实时定量PCR数据则表明Vasa mRNA和Nanos mRNA在胚胎发育各个阶段均有表达,且在未受精的卵细胞中表达量最高。整体原位杂交实验表明Vasa在受精卵中靠近皮质附近某位点特异性高表达,而从两细胞期开始直到囊胚期,Vasa阳性信号只在植物极某一分裂球内出现。这一Vasa特异表达的细胞应为原生殖细胞,它在两细胞阶段就已经开始在某一细胞表达,表明原生殖细胞的分化是由母源性遗传物质(生殖质)所决定。在原肠阶段,Vasa除了在原生殖细胞外,在胚孔(包括上下和左右唇)出现表达。这一在原肠阶段开始表达的Vasa为合子来源。由母源Vasa所标志的原生殖细胞在原肠阶段由原来胚孔反对极的位置向胚孔腹唇迁移并在原肠晚期到达腹唇,与合子源Vasa表达区合并。神经胚和幼虫早期阶段,原生殖细胞和合子源的Vasa的表达区互相混合不易区分;以上混合Vasa分别在神经胚尾芽和早期幼虫肠系的末端表达。30天左右幼虫晚期阶段,Vasa阳性信号沿肠道由原来肠系末端向前扩展到围鳃孔附近,在较浅色Vasa表达背景上,出现分散排列的深染色微型聚团。我们将浅染色区解释为可能合子源Vasa表达区,而深色聚团解释为原生殖细胞簇的表达位点。60天左右幼鱼,Vasa阳性信号沿肠道向前扩展到了围鳃孔之前,鳃腔的后部。在若干肌节腔内出现深色Vasa的表达。肌节腔为性腺原基,表明这时原生殖细胞已经开始逐步进入肌节腔,启动了性腺的发生。Nanos mRNA在正在分裂的受精卵植物极某位点特异性高表达,随着卵裂的进行,在早期胚胎植物极的某个分裂球内特异性表达。至原肠胚期,合子源Nanos mRNA在胚孔启动表达。母源Nanos基因由胚孔反对极迁移至合子源Nanos表达区。在神经胚期两者同时在尾芽表达,且难以区分。NanosmRNA与Vasa mRNA有着相同的表达模式,这进一佐证了本研究的结论。同时Nanos基因也应是文昌鱼生殖质的重要组成成分,在原生殖细胞的分化和迁移中起关键作用。