[目的]目前由于创伤、肿瘤或先天畸形等因素导致的人体各部位的软组织缺损,对患者的容貌和心理两方面都有严重的影响,对软组织缺损的修复重建仍是整形外科所面临的重大挑战,脂肪移植技术特别是自体脂肪移植是当今软组织修复与重建的常用技术手段之一,自体脂肪组织具有来源丰富、取材方便、安全可靠、无免疫排斥反应等优点。然而,移植后的脂肪存活率较低,一般仅为30%～60%,因此极大地影响了自体脂肪移植术后的远期疗效。移植区的血供建立不足,尤其是中央区移植组织不能获得足够的氧和营养,影响了移植后脂肪组织长期的存活率。因此,如何促进移植脂肪组织内部血供重建,缩短缺血期,提高移植组织的存活率,已成为自体脂肪移植研究中的热点和难点。本研究重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin, rhEPO)对脂肪移植存活率的影响,主要观察指标包括移植后的脂肪组织的微血管生成情况、坏死面积占每个切片视野的百分比、脂肪组织的质量和体积变化,而rhEPO可以通过基因工程手段大规模工业化生产,易于获取,便于应用于临床。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)在一定的条件下能诱导分化成脂肪细胞且自身能分泌一些细胞因子参与血管重建,其对脂肪移植存活率影响的观察指标和rhEPO一致,本课题主要是为了探究rhEPO和BMSCs是否对脂肪移植的存活是否有积极意义,以此能为人体自体脂肪移植的临床实践提供一些思考和应用的空间。[方法]1.选择实验动物：选用健康Balb/c小鼠72只,7周龄,体重20±1.5g,雌性。购自昆明医科大学实验动物中心。2.造模：从36只Balb/c小鼠皮下切取脂肪组织后剪碎,分成36等份,每份0.3g。将另36只实验小鼠分为A、B、C三组,每组12只小鼠,均给予戊巴比妥麻醉,麻醉成功后,用眼科剪在3组小鼠的右背部各剪开1约0.3cm的纵行切口,经切口。A组小鼠背部皮下注入0.3g经3000IU/kgrhEPO处理过的脂肪组织；B组小鼠背部皮下注入0.3g混有5×105个小鼠BMSCs的脂肪组织；C组小鼠背部皮下注入0.3g脂肪组织。脂肪注射完成后缝合好切口。3.试验分组及干预A组(EPO组)：共12只,给予清洁饮水、普通饲料,每3天给移植的脂肪组织注射一次rhEPO,共3次；B组(干细胞组)：共12只,给予清洁饮水、普通饲料：C组(空白组)：共12只,给予清洁饮水、普通饲料。4.取材：分别于术后30d、60d、90d时间点随机断颈处死12只小鼠(3组各处死4只)。将植入的脂肪组织连同包膜完整取出,用电子称称量移植脂肪组织的重量,用排水法测定其体积,再分别将12个脂肪块置于4%多聚甲醛溶液固定24h,脱水、石蜡包埋、切片,片厚3μm,常规苏木素-伊红(Hematoxylin and Eosin, H&E)染色,在100倍镜下观察组织与细胞形态结构。在100倍镜下,沿切片任一轴向,选择连续不重叠的所有视野,运用Point-counting计算坏死面积占每个视野的百分比。免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)染色(CD31)处理后,在200倍镜下,沿切片任一个轴向,从组织包膜开始选择连续5个不重叠视野,计数每个视野中微血管数,取均值。[结果]1.脂肪移植术后30d、60d和90d,同一时间点A组和B组的移植脂肪组织块的湿重都大于C组,且差异具有统计学意义(P<0.05),各组的组织湿重都呈下降趋势,而A组和B组的移植脂肪组织块的湿重相当,其差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较,各组不同时间点脂肪块的湿重差异都有统计学意义(P<0.05)。2.脂肪移植术后30d、60d和90d,同一时间点A组和B组的移植脂肪组织块的体积都大于C组,且差异具有统计学意义(P<0.05),各组的组织体积都随时间推移减小,而A组和B组的移植脂肪组织块的体积相当,其差异无统计学意义(P>0.05)。进行组内比较,各组不同时间点脂肪块的体积差异都有统计学意义(P<0.05)。3.脂肪移植术后30d、60d和90d,观察各组的H&E染色标本片,早期各组脂肪组织细胞结构完整、清晰,细胞分化较成熟,排列较规则,随着时间推移,各组出现不同程度的纤维化坏死组织,空泡数增多,C组尤其严重,同一时间点A组和B组的移植脂肪组织块的坏死面积比都小于C组,且差异具有统计学意义(P<0.05),且随时间推移,各组坏死面积比逐渐增大,而A组和B组的移植脂肪组织块的湿重相当,其差异无统计学意义(P>0.05)。进行组内比较,各组不同时间点脂肪块的坏死面积比差异都有统计学意义(P<0.05)。4.脂肪移植术后30d、60d和90d在200倍光镜下统计并计算IHC染色切片中的CD31蛋白阳性表达标记的微血管数,同一时间点A组和B组的移植脂肪组织块的微血管数都多于C组,且差异具有统计学意义(P<0.05),且随时间推移,各组微血管数逐渐增多,而A组和B组的移植脂肪组织块的微血管数相当,其差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较,各组不同时间点脂肪块的微血管数差异都有统计学意义(P<0.05)。[结论]1. Balb/c小鼠能很好的模拟自体脂肪移植的实验过程,其具有来源简单、成本低、实验重复性好的特点,是一种很好的研究自体脂肪移植的动物模型；2. rhEPO和BMSCs都能促进移植脂肪组织的存活；3. rhEPO和BMSCs都能促进移植脂肪组织中微血管形成。