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本文对 3 种果类褐腐病菌(Monilinia fructicola、Monilinia laxa、Monilinia fructigena)及燕麦镰孢菌(Fusarium avenaceum)分别建立了 LAMP(loop-mediated isothermal amplification)快速检测技术。褐腐病被认为是核果、仁果类水果上的一种毁灭性病害,美澳型核果链核盘菌(M.fructicola)、核果链核盘菌(M.laxa)、果生链核盘菌(M.fructigena)是果类褐腐病主要病原菌,在世界范围内广泛分布,可引起巨大的经济损失。燕麦镰孢菌(Fusarium avenaaceum)是大豆根腐病的一种主要致病菌,在国内外多数大豆种植区均有分布,其寄主广泛,能危害大豆、小麦等重要经济作物。本文研发的LAMP检测技术实现了对3种果类褐腐病菌及燕麦镰孢菌的快速检测。第一章的研究以3种果类褐腐病菌为目标病原菌,以SCAR(Sequence Characterised Amplified Region)分子标记的MO368特异片段为靶标序列,分别设计并筛选具有种的特异性的LAMP引物,建立能分别特异检测出M.fructicola、M.laxa和M.fructigena的3项LAMP检测技术,实现果类褐腐病的快速诊断。3种检测体系在扩增前加入染料HN(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,通过肉眼目测扩增结果,阳性反应为天蓝色,阴性反应为紫色。反应条件分别为63 ℃,40 min、63 ℃,40 min、63 ℃,70 min,检测灵敏度均为100 pg·μL-1。这3项检测技术都可以从人工接种发病的果肉病组织中检测出目标病原菌。同时,应用该技术,我们成功地从无锡机场截获的7份疑似李子褐腐病样本中,检测到3份美澳型核果链核盘菌(M.fructicola)呈阳性的病果样本,并分离到该病菌的纯培养。第二章的研究以燕麦镰孢菌(F.avenaceum)为目标病原菌,以Esyn1(环肽合成酶)作为靶标基因,设计并筛选具有种特异性的LAMP引物,建立了燕麦镰孢菌的LAMP快速检测技术。该方法在63 ℃等温条件下进行核酸扩增反应70 min,扩增前加入染料HN(羟基萘酚蓝),反应后可直接通过肉眼目测颜色变化判定结果,阳性反应呈天蓝色,阴性反应为紫色。该检测技术的最低检测限为100 pg.μL-1,并且能够从人工接种发病的大豆植株中检测出燕麦镰孢菌。