【摘 要】
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乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。雌激素(estrogen)对于维持正常乳腺组织的发育和功能至关重要，雌激素作用的发挥需要通过与雌激素受体α和β(ERα和ERβ)的结合，而ERα和ER
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乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。雌激素(estrogen)对于维持正常乳腺组织的发育和功能至关重要，雌激素作用的发挥需要通过与雌激素受体α和β(ERα和ERβ)的结合，而ERα和ERβ二者又都可以以很高的活性与各种组蛋白结合，而组蛋白的乙酰化是影响细胞各种生理功能的最典型的一种方式，它依赖于组蛋白乙酰化酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs)两类酶。在乳腺细胞中，ER正是通过募集如HATs和HDACs等转录共调节因子，利用它们呈现的各种酶活性来调控基因的表达。 目的 本文意在通过构建可在真核细胞中表达的重组质粒pcDNA3-HA-hdacl，研究组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和雌激素受体ERα和ERβ在体外的相互结合作用，以及HDAC1对ERα和ERβ蛋白水平的影响规律，从而在一定角度揭示乳腺细胞的增殖、分化和癌变的过程，为更好地寻找治疗癌症的药物靶标打下基础。 方法 ①从癌细胞中用TRIzol一步法提取总RNA产物； ②用Promega反转录试剂盒进行反转录合成cDNA； ③利用PCR技术扩增出hdacl基因完整编码区序列； ④通过DNA重组技术构建含hdacl片段的真核表达载体pcDNA3-HA-
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