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目的:本研究以体外培养的细粒棘球蚴原头节为研究对象,将不同浓度的P38抑制剂ML3403体外作用于细粒棘球蚴原头节,探讨P38抑制剂ML3403体外对细粒棘球蚴原头节的作用。方法:从自然感染细粒棘球蚴病的绵羊肝脏内采集细粒棘球蚴原头节,将其加入RPMI1640培养基中体外培养,5d后,将原头节分别加入不同浓度ML3403(12.5、25、50、80、100μmol/L)中体外孵育。每组加入原头节约2000个。不同浓度ML3403作用不同时间,在光镜下观察原头节的形态变化,同时利用伊红染色的方法显示原头节的活力并绘制活力曲线;电子显微镜下观察原头节超微结构改变;用Western blot检测原头节内p38蛋白表达水平;用Caspase-3活性检测试剂盒检测原头节内caspase-3酶活性。结果:孵育5d后,正常和DMSO对照组的原头节形态和活力几乎没有改变,而50μmol/LML3403组原头节活力下降约50.5%。通过伊红染色观察发现,随着ML3403作用时间的延长和浓度的增加,ML3403对原头节的生长抑制作用越明显。连续观察5d,100μmol/LML3403组对原头节有较强的杀伤作用,此时几乎没有存活的原头节;80μmol/L和50μmol/LML3403组的头节活力也分别仅为13.34±2.09%和49.5±1.88%。扫描电镜下观察发现ML3403作用初期,原头节体表出现指状突起、顶端体表出现皱缩,随着作用时间和浓度的增加,渐出现顶突界面缺损,吸盘变形,虫体表面出现凹陷,指状突起增多,甚至出现虫蚀样损害。透射电子显微镜下观察发现原头节体被合胞体带变薄,结构松散,囊泡扩张,微毛减少,甚至消失;部分实质细胞基质浓缩,细胞核核周隙增宽,核仁消失,核异染色质凝集,边缘化。Western bolt检测显示,ML3403可降低细粒棘球蚴原头节内p38蛋白表达水平。Caspase-3活性检测发现,较正常对照组,ML3403可使原头节的caspase-3酶活性增加。结论:P38抑制剂ML3403在体外有明显的抗细粒棘球蚴原头节的作用,有望成为一种新型的抗包虫药物。