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目的:本课题拟从脂代谢和脂质过氧化角度出发,通过建立实验性高胆固醇血症大鼠模型,研究黄酮化合物DH01调脂抗氧化作用及机制,并对其不良反应和毒性进行初步检测,通过临床前药理研究为临床试验提供参考,为开发调脂抗氧化新药打好基础。 方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟素组(50mg/kg)、阿伐他汀组(5mg/kg)、DH01低剂量组(5.67mg/kg)、DH01中剂量组(17mg/kg)、DH01高剂量组(50mg/kg),每组10只。(1)采用高脂乳剂灌胃的方法建立高脂血症大鼠模型。(2)给药两周和四周后,酶法测定血清TC、TG、LDL-c、HDL-c、计算AI、CHO-R。(3)末次给药后,取肝称重,计算肝指数,酶法测定肝脏TC、TG。(4)肉眼及光镜观察肝脏形态学变化。(5)免疫组化法检测肝脏LDLR的表达水平。(6)ELISA法测定血清ox-LDL含量、TBA法测定血清MDA含量、黄嘌呤氧化酶法测定血清SOD活性、二硫代硝基苯甲酸比色法测定血清GSH-PX活性。(7)50mg/kg、150mg/kg剂量灌胃DH01四周后测定大鼠肝肾功能指标,考察药物对肝肾功能的影响。(8)最大耐受量实验:一次性给小鼠灌胃DH01(6g/kg)、大鼠灌胃DH01(4g/kg),连续14天观察动物的状态及死亡状况。 结果:(1)高脂造模一周,模型组大鼠TC、LDL-c显著升高(p<0.01);高脂造模三周,模型组大鼠HDL-c显著降低(p<0.01),TC、LDL-c持续升高(p<0.01)。(2)给药两周及四周后,与模型组比较,DH01中、高剂量组(17mg/kg、50mg/kg)TC、LDL-c、AI、CHD-R显著降低,HDL-c显著升高(p<0.05或者p<0.01);给药四周后,DH01高剂量组(50mg/kg)TG显著低于水飞蓟素组和模型组(p<0.01)。(3)给药四周后,模型组肝脏TC、TG及TI显著高于正常组(p<0.05),DH01高剂量组(50mg/kg)肝脏TG显著低于模型组(p<0.05);同模型组比较,各给药组TI均显著降低(p<0.05或p<0.01)。(4)病理学观察:正常组大鼠肝小叶清晰可见,肝组织的形态学表现正常;模型组大鼠肝组织出现了弥漫性肝细胞脂肪变性,肝细胞变大,胞浆内脂滴多为大泡型,细胞核被挤向细胞周边;给药组肝组织轻度脂肪变性。(5)DH01组(50mg/kg)LDLR表达明显高于模型组及水飞蓟素组。(6)给药四周,与模型组比较,DH01组(50mg/kg)血清ox-LDL、MDA