具有pH传感和靶向功能的聚电解质组装微胶囊及微球的制备与性能研究

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与传统的层层组装制备技术相比,基于聚电解质-多价盐组装法(PSA)制备微胶囊具有步骤简单省时、尺寸易调控、结构材料多样性等优点,得到的胶囊在生物医药领域显示出极大的研究与开发价值。微胶囊负载活性物质进入细胞后的药效发挥与其所处位置有很大关系。具有pH传感功能的微胶囊可在细胞胞吞过程中不断报告其经历的pH值,帮助人们判断其所处的位置。本论文首先采用PSA法制备了聚烯丙基胺盐酸盐(PAH)-柠檬酸三钠(Na3Cit)聚集体(PAH-Cit),在表面沉积二氧化硅纳米粒子后再用硅酸处理,得到在pH 3-8之间可以稳定存在的微胶囊。将pH敏感及不敏感的荧光探针共同标记到微胶囊上使其具备pH传感的功能。由于微胶囊表面粗糙且带正电,微胶囊可被多种细胞自然胞吞。细胞内的实时pH检测结果表明,随着培养时间延长,超过90%的微胶囊处于pH 4.0-5.5的环境中,与溶酶体的pH高度一致。此外,用碳二亚胺盐酸盐(EDC)/琥珀酰亚胺(NHS)化学交联PAH-Cit聚集体,并在表面组装聚赖氨酸(PLL)和透明质酸(HA)分子,流式细胞仪检测结果表明修饰HA后微球具有一定的靶向能力,微球在宫颈癌细胞(HeLa)中的胞吞率是正常小鼠成纤维细胞(NIH 3T3)的两倍。进一步采用激光共聚焦显微镜对其pH进行检测,结果表明微球能够成功地大量进入HeLa细胞中,并最终处于酸性环境中,与溶酶体pH值一致。但是对于NIH 3T3细胞,微球仅仅只有少量粘附在细胞表面,并未进入细胞内部,这进一步佐证了微球对HeLa细胞的靶向能力。
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