【摘 要】
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天然抗菌肽是广泛分布在细菌、病毒以及动植物等各种生物体内的一大类具有抑制和/ 或杀灭病原微生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称。昆虫中的不含半胱氨酸的线性cecropin
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天然抗菌肽是广泛分布在细菌、病毒以及动植物等各种生物体内的一大类具有抑制和/ 或杀灭病原微生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称。昆虫中的不含半胱氨酸的线性cecropin 家族是最早发现的一类抗菌肽。从动植物中现已发现抗菌肽、蛋白有800个以上,一般说来,每个物种都可由一个前体分子经过一系列的加工而得到15-40 氨基酸残基的活性抗菌肽,许多抗菌肽具有很多功效,通过研究疏水端氨基酸可预测其特性。由于其具有分子质量小、对热稳定和抗菌谱广等特点,以及不同于抗生素的全新的抗菌机制,在近20 多年里,抗菌肽的开发和应用已成为研究的热点,在动植物转基因工程及药物开发领域具有广阔的应用前景。
抗菌肽CM4 是由张双全等人从中国家蚕中诱导获得的线性两亲的、α-螺旋肽,已证明CM4 是Cecropin 家族中的一个成员。为了提到抗菌肽CM4在大肠杆菌中的表达水平,我们将CM4基因克隆到pET32a 中,构建了CM4 融合串联表达载体pET32-nCM4(n=1,2,3… 8).。通过比较可溶性融合蛋白TrxA-nCM4(n=1,2,3… 8)的表达水平,我们选择BL21(DE3)/pET32-3CM4 为抗菌肽CM4 最佳串联表达菌株。在选定的培养条件和诱导条件下,抗菌肽CM4的表达量可以达到68mg/L,最大可溶性融合蛋白也可占到总可溶性蛋白的21%左右。
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