POCT核酸诊断集成微流控系统研究与实现

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一直以来,传染病对于公共卫生健康造成了严重威胁,尤其是2020年全球爆发的新冠肺炎,由于其传染性强,致病率高,在全球范围内的大流行给全世界造成了巨大损失。核酸检测方法因其优异的灵敏度、强特异性等显著优势,一直以来是传染病检测的金标准之一。尤其是,POCT(point-of-caretest)现场快速核酸检测由于具有诊断时间短、自动化水平高、操作简便等显著优势,正日益得到人们的密切关注。核酸诊断主要包括核酸提取和核酸扩增检测两大部分,传统的核酸检测中,这两个部分往往通过两类仪器,如核酸提取类设备、核酸扩增检测类设备分别独立完成,因此,核酸检测步骤繁琐,检测效率低,对各类设备依赖性强,不利于核酸诊断方法的推广应用。基于POCT核酸诊断概念,借助微流控芯片的独特技术优势,研究构建能够实现一体化核酸诊断的微流控系统,实现核酸提取到核酸扩增检测的相互集成,这对于提升核酸检测的整体性能具有重要意义。本文研究了基于微流控芯片,将核酸提取与核酸扩增检测相互集成的一体化POCT核酸诊断系统。首先,将固相提取膜集成到微流控芯片中,研究实现芯片上基于固相提取膜的核酸快速提取方法,通过配套的流体控制,实现了高效的核酸提取;其次,研究了基于RPA等温扩增技术的核酸扩增微流控芯片并构建了实时等温扩增微流控系统,实现了快速的核酸扩增与检测;最后,基于集成微流控芯片,在微流控芯片上将核酸提取与RPA等温扩增进行相互集成,研究实现了集核酸提取、RPA等温扩增与实时检测于一体的便携式POCT核酸诊断微流控系统。实验结果表明本文研究的POCT核酸诊断集成微流控系统的关键性能指标达到了预期要求,为实现POCT核酸快速诊断奠定了牢固的基础。
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