背景和目的：　　成纤维细胞生长因子21（Fibroblast growth factor 21，FGF21）是2000年Nishimura 等从小鼠胚胎组织中分离得到的一种与糖脂代谢有关的因子，是成纤维细胞生长因子家族（Fibroblast growth factors，FGFs）中特殊的一员，具有特异性调节人体脂肪组织对GLU的摄取、改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞的存活、降脂、抵抗饮食诱导性肥胖、诱导脂肪动员增加肝脏生酮作用、治疗神经性厌食症、保护神经细胞等生物学功能。天然的FGF21不稳定，易在溶液中聚集，目前已经采取了各种工程方法，以使液体配方稳定。随着我国生物技术及药物开发技术逐渐发展创新，针对生产企业全过程的质量控制要求日渐规范，故对FGF21在进行发酵、纯化、复性等一系列研究过程中的质控方法是工艺研究的前提保证。　　本研究立足于FGF21最基础的检定学研究，建立对FGF21产品（原液或成品）的蛋白质鉴别试验、蛋白质含量测定、内毒素检测的质量检测标准。目的在于验证常用检定方法的适用性，明确操作步骤，初步摸索 FGF21 有效、可行的检定方法，为FGF21质量控制提供依据。　　方法：　　以《中国药典》（2015 年版）为遵循规范和指导原则，依据三项检查内容的检查方法原理，本实验采用免疫印迹法和免疫斑点法鉴别 FGF21 蛋白性质，初步拟定试验方法；分别用Folin-酚试剂法（Lowry法）、染色法（Bradford法）、BCA 法、紫外-可见分光光度法四种方法来测定 FGF21 样品的蛋白质含量；对FGF21样品进行凝胶法细菌内毒素检查，针对在FGF21生产制备过程中可能产生内毒素的原料进行分析，探讨内毒素质量控制的方法。　　蛋白质鉴别试验采用免疫学方法，分别是免疫印迹法和免疫斑点法。二法均是将供试品先与特异性抗体结合，再将该结合物与特异性抗体的酶标抗体在适宜的条件下结合，予以酶学显色反应，检查蛋白质的抗原特异性，本研究采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。　　蛋白质含量测定有福林酚法（Lowry法）、考马斯亮蓝法（Bradford法）、2,2’-联喹啉-4,4’-二羧酸法（BCA 法）、紫外-可见分光光度法四种方法。前三法均先进行有色反应，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质含量。紫外-可见分光光度法是根据共轭双键在280nm处的吸光度大小与蛋白质浓度呈正比的而进行测定。　　细菌内毒素实验采用凝胶法。第一步是进行鲎试剂灵敏度复核试验，确定标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。第二步进行干扰试验，按照内毒素浓度/被加入内毒素的溶液制备4组溶液：无/供试品溶液（A）、2λ/供试品溶液（B）、2λ/检查用水（C）、无/检查用水（D），按鲎试剂灵敏度复核试验进行操作。第三步为凝胶限度试验。将上述 A、B、C、D 溶液分别按鲎试剂灵敏度复核试验操作进行。第四步为凝胶半定量试验。将上述 A、B、C、D 溶液参照凝胶半定量试验溶液制备要求制备相应的溶液。　　结果：　　免疫印迹法与免疫斑点法的条带明显。用福林酚试剂法（ Lowry法）测得FGF21样品的蛋白质含量为1.55±0.02mg/ml、考马斯亮蓝染色法（Bradford法）测得FGF21样品的蛋白质含量为2.602±0.074mg/ml、BCA法测得FGF21样品的蛋白质含量为1.75±0.09mg/ml、紫外-可见分光光度法测得FGF21样品的蛋白质含量为0.928±0.002mg/ml。已验证FGF21原液、原液辅料、甘氨酸、精氨酸、泊洛沙姆188、甘露醇、注射用水对FGF21样品内毒素凝胶法检测无干扰作用；实验显示样品稀释倍数、鲎试剂灵敏度的高低与内毒素干扰试验的成功有关。　　结论：　　免疫印迹法与免疫斑点法可以很好的鉴别 FGF21 这一蛋白；用福林酚试剂法（Lowry法）、考马斯亮蓝染色法（Bradford法）、BCA法、紫外-可见分光光度法四种方法均可用来测定FGF21样品的蛋白质含量；鲎试剂检测FGF21样品内毒素方法可行。凝胶法可以对FGF21进行限度检测或半定量检测。