论文部分内容阅读
侧耳属(Pleurotus)属担子菌纲,广泛分布于全球各地,因其易于栽培,产量大,在全世界最重要的蘑菇栽培中位居第二。目前,已发现的侧耳属中约有50多种,比较常见的食用侧耳属品种有杏鲍菇(P. eryngii)、白灵菇(P. nebrodensis)、姬菇(P. cornucopiae)等。侧耳属真菌富含多种生物活性物质,如碳水化合物、蛋白质、微量元素、酶、食用纤维以及维生素等等,来自于子实体或液体培养的多糖具有潜在的抗氧化活性、抗癌和免疫调节作用。本文以杏鲍菇(SI-01)、白灵菇(SJ-02)、姬菇(SS-01)为实验菌株,通过单因子试验、正交试验得出了杏鲍菇、白灵菇、姬菇胞内多糖(intracrullar polysaccharide, IPS)最佳提取条件,并初步分析比较了三个菌株的抗氧化能力。选取杏鲍菇(SI-01)为研究对象,通过单因子(Plackett-Burman, PB)试验和响应面试验(response surface methodology, RSM)的方法确定了其胞内和胞外多糖(exopolysaccharide, EPS)的最佳提取优化条件,并分析了杏鲍菇多糖在体内和体外的抗氧化能力,得出以下结论:杏鲍菇、白灵菇、姬菇IPS的正交试验结果分别为当超声波处理时间为20min、提取温度为80℃、提取时间为2.5h和乙醇浓度为90%时,杏鲍菇IPS得率为7.5±0.3%;当超声波处理时间为25min、提取温度为85℃、提取时间为2h和乙醇浓度为90%时,白灵菇、姬菇IPS得率分别为7.1±0.4%和8.2±0.5%。杏鲍菇IPS响应面结果为超声波破壁时间14.22min、水浸提温度70.57℃、乙醇浓度91.28%和pH7.59,胞内多糖得率达6.58%;杏鲍菇EPS响应面结果为醇沉时间20.24h,乙醇浓度89.62%,pH8.17,此时提取量为7.27g/L。测定了杏鲍菇、白灵菇、姬菇IPS对超氧阴离子自由基(O2-·)、二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)和羟自由基(·OH)的清除能力并用普鲁士蓝法测定还原力。结果表明,胞内多糖有明显抑制O2-·、·OH和DPPH自由基的作用,具有一定的还原力,呈现量效关系。三个菌株对羟基自由基的抑制率分别为32.2±2.8%、16.1±1.5%、38.7±3.1%,对DPPH和超氧阴离子的清除率分别为19.1±1.5%、16.3±1.3%、20.3±1.8%和17.9±1.6%、16.8±1.4%、20.5±1.7%。杏鲍菇胞外多糖具有明显抑制O2-·、·OH和DPPH自由基的作用,具有一定的还原力,呈现量效关系。胞外多糖对O2-·、·OH和DPPH的抑制率分别为59.63±3.72%、38.69±2.59%、66.36±4.42%,比2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(butylated hydroxytoluene, BHT)高12.74±1.03%、8.01±0.56%、12.19±1.05%;还原力为0.98±0.05,比BHT高60.66±5.14%。通过测定小鼠心、肝、脾、肾组织和全血的脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性,观察了多糖对机体各组织及全血抗氧化能力的影响。结果表明,IPS和EPS能提高小鼠组织及全血超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并能降低丙二醛(MDA)的含量,提高了机体抗活性氧损伤的能力,为防止或减轻脂质过氧化损伤提供了试验依据。试验结果表明,侧耳属胞内多糖和胞外多糖均具有较强的体内和体外抗氧化能力,为侧耳属多糖的抗氧化机制及构效关系的深入研究奠定了基础。