不同浓度催乳素对人早孕滋养层细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hunterfall_horse
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研究目的探讨不同浓度催乳素(PRL)对人早孕绒毛外滋养细胞株HTR-8\Snveo增殖、迁移和侵袭功能的影响。研究方法1.本研究以人早孕绒毛外滋养细胞株HTR-8\Snveo细胞作为研究对象,按催乳素干预剂量的不同,实验分为3组:空白组(0ng/mL)、低浓度PRL(10ng/mL)刺激组、高浓度PRL(100ng/mL)刺激组。2.通过应用细胞划痕修复实验、transwell小室侵袭实验来探讨PRL是否对HTR-8\Snveo细胞迁移和侵袭功能有影响。3.利用CCK-8比色法检测不同浓度PRL干预处理24小时后各组实验细胞的增殖活力。4.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和双抗体夹心ELISA法分别从mRNA和蛋白水平检测本实验浓度范围内的PRL干预处理后各组实验细胞的表达和分泌与侵袭密切相关的标志物MMP-2和E-cad情况。研究结果1.细胞划痕修复实验结果显示各组实验细胞迁移修复率(%)分别为28.02±0.75、37.80±0.42、42.12±0.31,经方差分析,各组之间的差异具有统计学意义(P均<0.05)。2.Transwell小室侵袭实验检测结果显示:与对照组(100±6.56)相比,经10 ng/mL、100 ng/mL浓度PRL孵育24h后的HTR-8/SVneo细胞的侵袭指数(分别为142.68±4.91、189.59±4.10,P均<0.05)明显升高,且HTR-8/SVneo细胞随PRL浓度的增加侵袭指数也随之升高,差异具有统计学意义。3.CCK-8法检测各组细胞增殖能力,所测结果数据显示,对照组OD值为1.08±0.04,实验组分别为1.09±0.05、1.13±0.06,P均>0.05,差别无统计学意义。4.RT-PCR及Elisa实验数据分析结果显示,与对照组比较,不同浓度的PRL均能显著上调MMP-2的mRNA及蛋白表达水平(P均<0.05),下调E-cad的mRNA及蛋白表达水平(P均<0.05),并呈现浓度依赖效应。研究结论1.在本实验浓度范围内,PRL可促进HTR-8/SVneo细胞体外迁移、侵袭能力,且随着PRL浓度升高其迁移、侵袭能力随之增强。2.不同浓度的PRL(0、10、100ng/m L)对HTR-8\SVneo细胞的增殖活力无影响。3.实验浓度范围内的PRL均能上调MMP-2的mRNA及蛋白表达水平,而下调E-cad的mRNA及蛋白表达水平,从而促进HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭功能。
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