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目的:脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是十分严重的脊柱疾病并发症,常会引起损伤节段以下肢体严重的功能障碍,其发生率呈逐年上升的趋势,但由于神经元本身再生能力不足,脊髓损伤的治疗一直是医学界难点。随着细胞技术的进步,外源性干细胞移植为脊髓损伤的治疗提供一种可能有效的方法。骨髓间充质干细胞有较强的自我更新和增殖能力,且来源广泛、分离培养简单,有望成为治疗脊髓损伤的“种子细胞”。但由于移植后的骨髓间充质干细胞在宿主体内成活率及转化率较低,其在实验研究及进一步应用中受到很大的限制。mi RNA是一类高度保守的非编码小RNA分子,在生物体内广泛存在,对真核生物的基因表达、细胞周期调控和个体发育等均有影响。有研究发现mi RNAlet-7b有促进干细胞分化,调控神经干细胞的自我修复和更新。但在治疗脊髓损伤方面,mi RNAlet-7b修饰的骨髓间充质干细胞是否比单纯的骨髓间充质干细胞移植修复疗效更好,目前尚未有研究报道。本实验目的是通过免疫组织化学染色法检测骨髓间充质干细胞移植后大鼠脊髓组织中神经丝蛋白200(neuro filament200,NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(gilal fibrillary acidic protein,GFAP)的表达,初步探讨mi RNAlet-7b修饰骨髓间充质干细胞在大鼠脊髓损伤修复中的作用及其机制。方法:选取SD大鼠60只,采用随机数字表法分为3组:对照组、BMSCs组、mi RNA组,每组20只。3组均采用改良Allen’s法制备T12脊髓损伤模型。造模后1周,对照组仅在损伤部位注射等量的生理盐水,BMSCs组大鼠移植阴性对照慢病毒载体感染的BMSCs,mi RNA组大鼠移植mi RNA let-7b慢病毒载体感染的BMSCs。分别于移植后3天、1周、2周、4周、8周按Basso Beattie Bresnahan(BBB)标准量表对大鼠后肢运动功能进行评分。采用免疫组织化学染色法检测并统计脊髓组织中NF200染色阳性细胞数和GFAP染色阳性面积,应用HE染色方法评估损伤段脊髓组织的病理变化。所有数据均用SPSS19.0软件统计分析,定量资料用x?s的形式来表示。各组间比较采用单因素方差(ANOVA)分析,如3组方差齐时,采用t(LSD-t)检验进行组间的比较,如3组之间方差不齐时,则采用Tamhane’s T2进行检验,检验水准α=0.05。结果:1、造模后3组大鼠均出现了严重的双下肢功能障碍,此时3组大鼠BBB评分结果比较,差异无统计学意义(F=0.500,P=0.622);细胞移植后,3组大鼠BBB评分均不断升高,大鼠双下肢运动功能也有所改善,移植后各时间点大鼠BBB评分比较:mi RNA最高、BMSCs组次之、对照组最低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。2、NF200免疫组化结果显示:细胞移植后3天,3组大鼠脊髓内NF200阳性细胞数比较,mi RNA组略高,但各组间比较无统计学意义(F=1.275,P=0.325);随实验进展,细胞移植后1周、2周、4周、8周NF200染色阳性细胞数均不断增多,其中mi RNA组最多、BMSCs组次之、对照组最少,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)3、GFAP免疫组化结果显示:对照组GFAP染色阳性面积比较持续性升高,mi RNA组和BMSCs组先升高后降低。3组GFAP染色面积比较:对照组最高、BMSCs组次之,mi RNA组最低,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。4、HE染色观察:3组大鼠脊髓组织内均可见组织结构紊乱充血,神经细胞水肿等病理变化,mi RNA组和BMSCs组病理学改变较对照组轻。结论:1、骨髓间充质干细胞移植可以提高脊髓损伤大鼠的双下肢功能,mi RNAlet-7b修饰的骨髓间充质干细胞对大鼠脊髓损伤修复效果更好。2、骨髓间充质干细胞在脊髓组织微环境下能分化为神经元样细胞,mi RNAlet-7b能促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化;骨髓间充质干细胞移植可以减少星形胶质细胞的GFAP表达量,抑制损伤脊髓组织中胶质瘢痕的生成,mi RNAlet7b修饰的骨髓间充质干细胞作用更强。3、mi RNAlet7b修饰的骨髓间充质干细胞可减轻大鼠脊髓损伤后的病理变化。