欧李叶片再生及炼苗技术的研究

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欧李(Cerasus humilis Bag.)是蔷薇科樱桃属的一种小灌木果树。近年来山西农业大学的科研人员已从野生欧李中选出了一系列的优良类型和品种。本试验以其中的3个品种为试材,进行了叶片的愈伤组织诱导、分化再生及炼苗移栽等组培技术的研究。主要研究结果如下: (1)不同种类、不同浓度的激素及其组合对叶片愈伤组织的诱导率、愈伤组织的质量及再分化的能力有较大的影响,以MS+6-BA0.12~0.16mg/L+NAA0.8~1.2mg/L的效果最好,MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.8~1.2mg/L次之。(2)取材前的生长环境、叶片在枝条上的着生部位、单叶的部位及接种方式均影响愈伤组织的诱导。其中,来源于试管苗的叶片好于温室叶片,大田叶片最差;枝条上部叶好于中部叶,下部叶最差;单叶上,叶片中部好于叶片基部,叶片上部最差;叶片反放好于叶片正放接种。(3)欧李愈伤组织的产生首先需要黑暗条件的启动,其扩增与生长分化则需在光下进行;接种后直接进行光照处理,抑制愈伤组织形成。(4)品种与愈伤组织诱导关系密切,3个品种中,“农大欧李3号”是最易产生愈伤组织的品种。(5)MS+BA0.2mg/L+2,4-D1.4mg/L是最佳的愈伤组织增殖培养基。愈伤组织芽分化的最佳培养基是1/4MS+ZT2.0mg/L,芽分化率达17.1%;1/4MS+BA2.0mg/L次之。(6)培养基MS+BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L是诱导芽苗增殖的最适培养基,MS+BA0.2mg/L+IAA0.05mg/L次之。(7)诱导农大欧李4号芽苗生根的最适培养基为1/2MS+IAA1.2mg/L,诱导农大欧李3号和5号芽苗生根的最适培养基为1/2MS+IAA2.4mg/L。(8)光培炼苗期间以闭瓶炼苗10d,开瓶炼苗1d的移栽成活率为最高。光培炼苗后的小苗移栽于小拱棚覆盖的基质中,昼夜温度保持在18~30℃,保持湿度前期在80~100%,后期逐渐过渡到50~60%,成活率可达90%以上,45~50d后,再倒栽到营养钵中,成活率可达95%以上。 本试验较详细地研究了欧李叶片愈伤组织的诱导再生及炼苗技术中的主要技术环节,为欧李的无性系诱导变异和转基因提供了研究基础。
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