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研究表明,前列腺素（prostaglandins,PGs）可以介导促黄体生成素（LH）在排卵过程中的功能,而前列腺素的合成涉及一系列酶的参与,其中包括前列腺素过氧化物合酶（PTGS,也叫环氧合酶,COX）和胞质型磷脂酶A2（cPLA2）。在先前的研究中,我们系统地研究了斑马鱼中前列腺素过氧化物合酶（ptgs）基因在排卵调控中的作用。然而,斑马鱼中cPLA2在排卵调控中的作用尚未确定。因此,本研究以性成熟的雌性斑马鱼为研究对象,系统探讨了胞质型磷脂酶A2-IVA（PLA2G4A,也叫胞质型磷脂酶2 alpha,cPLA2α）在排卵前滤泡中前列腺素分泌和排卵调控中的作用,主要获得的研究结果如下:1、运用Real-Time PCR技术检测两个cpla2α基因（pla2g4aa和pla2g4ab）在斑马鱼滤泡中的表达分布和不同发育时期的表达模式。其中,pla2g4aa在滤泡层细胞中极显著表达,而在pla2g4ab在滤泡层细胞和卵母细胞中表达量无显著性差异。并且pla2g4aa的表达量从PV期（previtellogenic stage）开始升高,直至FG期（full grown）达到最高值;相较于FG期时,pla2g4aa的表达量在M期（maturation stages）有一个显著上调,而pla2g4ab的表达量在M期则显著下调。提示两个cpla2α基因中pla2g4aa可能在斑马鱼卵母细胞成熟以及排卵的调控机制中起着更重要的作用。2、实验室前期构建了研究斑马鱼排卵的理想模型（孕激素核受体npr敲除导致不排卵的斑马鱼）,最终获得直接证据表明npr是介导LH调控排卵的关键因子。因此,我们运用该模型进一步验证cpla2α基因是否在排卵调控机制中起作用,结果显示pla2g4aa在npr敲除的斑马鱼模型中显著下调,而pla2g4ab则没有显著性变化。提示两个cpla2α基因中的pla2g4aa可能在斑马鱼排卵的调控机制中起着重要作用。3、在前期的研究中,实验室已经建立了成熟的斑马鱼体外诱导排卵模型。为了探究LH surge是否能够调控上述基因的表达变化。我们在体外用hCG刺激模拟LH surge,并选取FG期的卵泡细胞设置了浓度梯度和时间梯度两组实验,运用Real-Time PCR技术检测pla2g4aa和pla2g4ab的表达量变化。在浓度梯度组,其中的pla2g4aa受hCG的刺激表达量显著上调,在hCG浓度为50 IU/mL时达到峰值;在时间梯度组,pla2g4aa从刺激1小时开始表达量显著上调,在3小时达到峰值。然而pla2g4ab的变化量在两组实验中均无明显变化。提示两个cpla2α基因中pla2g4aa受LH信号的调控。4、为了进一步了解LH如何对pla2g4aa进行调控,我们进行原代细胞刺激实验。结果显示,在PKA信号通路中,cAMP的类似物或者激活剂都能显著上调pla2g4aa的表达;而PKA的选择性抑制剂能显著终止由hCG刺激的pla2g4aa表达上调,并导致其表达下调。在PKC信号通路中,PKC的激活剂同样也会上调pla2g4aa的表达,而MEK的抑制剂则下调pla2g4aa的表达。证明不论是cAMP-PKA信号通路或是PKC信号通路都参与了对pla2g4aa表达的调控。5、为了探究cPLA2α的表达是否可能是产生前列腺素的必要条件,并且对排卵效率是否产生影响,我们在体注射了cPLA2α的抑制剂。结果显示前列腺素E2（PGE2）和前列腺素F2α(PGF2α)的浓度都在抑制剂注射两小时后极显著下调;注射抑制剂的雌性斑马鱼不发生排卵,且hCG和抑制剂共注射组的结果显示抑制剂能有效地限制hCG所诱导的排卵进程。证明cPLA2α的表达调节前列腺素的浓度变化,从而调控排卵机制。综上所述,这些结果表明斑马鱼中的cPLA2α与排卵调控过程相关,且两个cpla2α基因中起主导作用的是pla2g4aa。