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细胞色素C(Cytochrome C,Cyt c)与细胞色素C氧化酶(Cytochrome C oxidase,COX)是线粒体呼吸链终端的一对酶,Cyt c是线粒体呼吸链上的电子传递体,酶存在下对组织氧化还原起快速酶促作用。COX位于细胞色素系统末端,可接受来自四个Cyt c的四个电子,并将其传递到双氧原子,将其还原为两个水分子,同时跨膜运输四个质子,这样就形成了跨膜的质子电化学势能差,从而这一势能差可以被三磷酸腺苷合酶用于制造生物体中最基本的能量分子ATP。线粒体代谢与神经疾病、肿瘤的关系引起了人们的广泛关注,所以了解Cyt c/COX的反应动力学研究对相关疾病的病理学研究具有重大意义。表面等离子体激元共振(Surface plasmon resonance,SPR)技术是是研究生物分子与其它分子相互作用的有力工具,具有高灵敏、免标记、实时检测等优点。SPR技术与电化学二者相结合后可同时检测芯片物质的电化学和光学两个方面性质的改变,且可以更好实现对芯片表面组装蛋白的控制。本课题采用氨基偶联的方法将COX固定于金膜表面,通过现场电化学技术控制Cyt c氧化/还原态,利用EC-SPR研究Cyt c与表面固定的COX之间的相互作用,通过非线性曲线拟合得到还原型Cytc/COX相互作用动力学速率常数:ka=7.68×105mol-1·L·s-1,kd=0.0266s-1;动力学常数Ka=3.01×107mol-1·L,Kd=3.32×10-8mol·L-1。氧化型Cyt c/COX相互作用的动力学速率常数:ka=4.06×104mol-1·L·s-1,kd=0.0059s-1;动力学常数Ka=6.84×105mol-1·L,Kd=1.04×10-6mol·L-1。p-淀粉样多肽(amyloid β-peptide,Aβ)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)病理学特征——淀粉样斑块的主要成分,与AD的发生密切相关。作为传导神经突触信号的重要介质,多巴胺(dopamine,DA).去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)等小分子可与Aβ发生作用,对脑部神经元产生不同的影响。为了继续深入理解Ap与神经传导介质小分子的相互作用对AD病理发展的影响,本论文分别研究了DA与Aβ12-25、Aβ12-28,NE与Aβ1-16相互作用的机制,获得了相关动力学参数。研究发现,DA与Aβ疏水段的作用位点是Lys28,DA/Aβ12-28的解离常数Kd为2.92μmol·L-1;NE与Ap作用来自NE的羟基与Ap的Tyr10之间的氢键,NE/Aβ1-16的解离常数Kd为0.59μmol·L-1。