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黄羽肉鸡是我国特有家禽品种,羽毛的生长发育状况是其重要的商品性状,决定其销售价格。然而,在规模化养殖过程中,约有15%的黄羽肉鸡出现羽毛发育迟缓并存在不同程度的脱羽现象,降低了其活体外观及屠体品质,但其原因尚不清楚。因此,本论文研究了黄羽肉鸡胚胎期和生长全期羽毛生长发育规律、胚胎期毛囊形态发生过程及Wnt/β-catenin信号通路蛋白质的表达规律;并基于鸡胚胎模型,探究了Wnt/β-catenin信号通路的特异抑制剂Dickkopf-1(DKK1)对黄羽肉鸡毛囊发育和羽毛生长的影响及可能机制,旨在为阐明黄羽肉鸡羽毛生长发育调控机制奠定理论基础。论文分为3个部分,具体为:试验1:旨在探究黄羽肉鸡胚胎期和生长全期羽毛的生长发育规律。试验分别在黄羽肉鸡胚胎期E8(Embryonic day,胚龄)、9、10、11、12、13、15、17、19、DOH(Day of hatching,出壳当天)及出壳后D7(Day,日龄)、14、21、35、49、63、77、91、105和119,每个时间点选取20枚鸡胚(或20只鸡)采集不同羽区羽毛样品,测定羽毛质量和长度,并采用Logistic、Bertalanffy和Gompertz生长曲线模型对羽毛质量和羽毛长度进行生长曲线拟合分析。试验2:研究了黄羽肉鸡胚胎期羽毛毛囊形态发生过程及在此过程中Wnt/β-catenin信号通路蛋白质的表达规律。分别在胚胎期E7(第7胚龄)、8、9、10、11、12、13、15、17、19及DOH每个时间点选取12枚鸡胚,采集其背部皮肤组织样品。采用H&E(hematoxylin-eosin)染色,观察毛囊形态发生过程,并测定毛囊密度;Western blotting检测背部皮肤毛囊组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白质的表达规律。试验3:探究了胚蛋注射DKK1对黄羽肉鸡毛囊发育和羽毛生长的影响及其调控机制。将质量均一的120枚受精蛋(9胚龄),随机分为4个处理,处理1不注射任何溶液(CON组),处理2注射100μL/枚的PBS(PBS对照组),处理3注射100μL/枚含600 ng DKK1的溶液(600 ng DKK1组),处理4注射100μL/枚含1,200 ng DKK1的溶液(1,200 ng DKK1组)。出壳当天统计出雏率,并收集DOH羽毛样品测定羽毛质量;采集皮肤组织样品,H&E染色观察毛囊发育情况,并测量毛囊密度与毛囊直径,同时测定Wnt/β-catenin信号通路蛋白质表达。结果表明:(1)黄羽肉鸡在胚胎期E10羽毛开始生长,E13~E17羽毛生长速度较快,E17~DOH羽毛生长速度变慢;与Logistic和Bertalanffy生长曲线模型相比,Gompertz曲线(Y=798.48e-203431.24exp(-0.87t),R2=0.997,Y为羽毛质量表达式,e为常数,t为胚龄)最适合拟合胚胎期全身羽毛生长。黄羽肉鸡出壳后,羽毛从DOH~D14生长缓慢,从D21~D91快速生长,D91后生长速度较慢。三个曲线模型均能较好拟合黄羽肉鸡生长全期全身羽毛生长情况(R2>0.970),且以Bertalanffy模型Y=116.88×(1-0.86e-0.02t)3为最优拟合模型,拟合度最高及残差平方和最小(R2=0.987,RSS=101.760)。(2)从E7~E9黄羽肉鸡背部皮肤突起逐渐增加,E9羽芽开始形成,E10~E11背部羽芽逐渐伸长,E12~E13表皮细胞聚集并内陷形成毛囊壁,E15毛囊形态发生基本完成;E12出现初级毛囊,E15出现次级毛囊;初级毛囊密度在E12~E15逐渐增加,之后逐渐下降,次级毛囊密度在E15~DOH逐渐增加。Western blotting结果表明,β-catenin蛋白质在E8时表达量较低,E9~E12时表达量显著增加(P<0.05),E13~DOH表达量逐渐回落(P<0.05);其下游TCF4、Cyclin D1和c-Myc蛋白质表达量与β-catenin趋势一致。β-catenin蛋白质免疫荧光结果与Western blotting的结果一致。(3)与CON和PBS组相比,胚蛋注射DKK1对黄羽肉鸡孵化率和出壳重无显著影响(P>0.05),但会显著降低全身及腹部、颈部、翅部、头部和腿部等羽区羽毛的相对质量(P<0.05);与CON和PBS组相比,胚蛋注射600 ng/枚和1,200 ng/枚DKK1均会显著降低毛囊密度和毛囊直径(P<0.05)。Western blotting结果表明,DKK1显著下调皮肤毛囊组织中β-catenin及其下游TCF4、Cyclin D1和c-Myc蛋白质的表达(P<0.05),β-catenin免疫荧光结果与Western blotting的结果相一致。结论:(1)黄羽肉鸡羽毛在胚胎期和生长期均呈现缓慢-快速-缓慢的生长趋势,Gompertz模型和Bertalanffy模型分别适合模拟胚胎期和生长全期羽毛的生长发育过程。(2)毛囊在E7~E15逐渐形成,Wnt/β-catenin信号通路蛋白质在毛囊形态发生过程中表达量显著上调。(3)胚蛋注射DKK1阻断Wnt/β-catenin信号通路可显著抑制黄羽肉鸡毛囊发育和羽毛生长,提示Wnt/β-catenin信号通路直接参与黄羽肉鸡的毛囊发育和羽毛生长。