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转化生长因子β(transforming growth factors β,TGF β s)是一组多效性细胞因子,可以调节细胞的增殖、分化、粘附、迁移及凋亡等,并在胚胎发生、器官发育及免疫反应等方面发挥重要作用。TGF-β s及其受体在睾丸生精上皮不同生精时相的表达和分布差异,表明TGF-β在精子发生过程中具有重要的作用,包括Leydig细胞功能,睾丸发育,细胞增殖及细胞凋亡等方面的调节,对血睾屏障(BTB)的开启和闭合也有作用。在精子发生及成熟过程中,存在着生精细胞的主动退化现象,现已证明生精细胞的主动退化是通过细胞凋亡来完成的。细胞凋亡对维持成熟精子的数量,保证睾丸发挥正常生理机能具有重要意义。在某些病理条件下,如垂体切除术、实验性隐睾、给予促性腺激素释放激素拮抗剂等也会造成生精细胞凋亡,产生生精障碍。现已发现TGF β s参与多种细胞的凋亡过程,但TGF β s是否参与生精细胞凋亡,尚缺乏足够的实验证据。 本课题为了探讨TGF β s在人睾丸精子发生过程中的作用,及其在实验性隐睾诱导的生精细胞凋亡过程中的作用。应用免疫组织 第四军医大学硕士学位论文化学SABC法并结合人翠丸生精上皮周期的时相特点,对TGF日s及其受体在人辜丸生精上皮生精周期的分布和表达进行了研究。通过实验性大鼠单侧隐翠模型动物,建立生精细胞凋亡模型,应用免疫组织化学和细胞凋亡原位检测法比较了TGF ps受体在隐翠侧及对照侧正常翠丸的表达情况,试图分析TGF日s在生精细胞凋亡过程中的作用机制。 结果表明: 1.Torpl在人辜丸主要表达于Leydig细胞,而ToFp3广泛分布于Leydig细胞,Sertoli细胞和初级精母细胞及精子细胞。TGF日3在精子细胞中的表达与精子发生周期密切相关。TGF旦一Rl在皋丸间质Leydig细胞中表达较强,在Sertoli细胞中较弱,在精原细胞及初级精细胞中则无阳性反应。TGF旦一RH蛋白定位于Leydig细胞和生精上皮中除了管周肌样上皮细胞外的所有细胞,并与生精周期相关,在11一VI期的粗线期精母细胞强阳性表达,到I期,当初级精母细胞刚进入减数分裂前期时,表达逐渐减弱直至消失。 2.从术后4d组开始,隐皋侧曲细精管凋亡细胞数即明显高于对照侧,并于14d达到峰值,随后开始下降。各组内阳性曲细精管率及Al值均有显著差异(P<0.01)。TGF日一Rn在曲细精管中各级生精细胞中均有表达,不同时间组内隐翠侧曲细精管内阳性TGF日一Rn生精细胞数明显低于对照侧(P<0.01)。 TGF旦s及其受体在人翠丸生精上皮生精周期的分布和表达的实验结果提示,TGF es在翠丸中的表达可能具有种属特异性,其表达方式与生精上皮周期密切相关,可能在精子发生过程中具有重要的调控作用。 TGFD受体在隐翠诱导的细胞凋亡过程中,随着生精细胞凋亡数目的增加,表达量降低,提示TGFp可能参与了生精细胞的第四军医大学硕士学位论文凋亡过程,但其具体作用机制还有待于进一步深入研究。