【摘 要】
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该论文的目的是要获得气孔关闭前后保卫细胞液泡内颗粒状物在线度和分布密度上的变化以及在气孔关闭过程中保卫细胞液泡中pH的动态变化,并将结果与气孔开放过程获得的研究结
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该论文的目的是要获得气孔关闭前后保卫细胞液泡内颗粒状物在线度和分布密度上的变化以及在气孔关闭过程中保卫细胞液泡中pH的动态变化,并将结果与气孔开放过程获得的研究结果相比较.研究内容分以下三个部分:a)用玻璃毛细管从开放态及ABA诱导的闭态保卫细胞液泡中直接取样,并将样品滴放在formvar包裹的铜网上,经醋酸铀负染后在透射电镜下观察.观察结果与该试验室已发表的气扎开放过程的实验结果一致:开放态气孔保卫细胞液泡所含颗粒状物的线度极小(平均直径≤10nm),且分布密度极高,而经ABA处理的关闭态气孔保卫细胞液泡所含颗粒状物的线度很大(平均直径≥50nm),分布密度很小.b)用缓冲液(Mes-Tris)调控体外系统的保卫细胞液泡液的pH:预先在毛细管尖部汲取一定量的缓冲液,调控随后用同一毛细管取得的保卫细胞液泡液系统的pH.经电镜观测证实:保卫细胞液泡液内颗粒物聚集状态受pH的介导.用玻璃毛细管从液泡取样的方法,克服了传统方法从分离保卫细胞原生质体入手,再分离液泡的复杂、污染机会多、工作量极大等缺点.而且该方法除了能减少受污染的机率外,还达到了10<-3>nL级的取样能力.该发展为保卫细胞与其它小细胞液泡的进一步研究提供了新思路.c)该工作通过激光共聚焦显微术配合pH荧光探针BCECF AM的单激发(488nm)双发射的荧光比值法(525nm/640nm)观察到,用ABA处理的表皮条上的开放态气孔在关闭过程中其保卫细胞液泡内pH有一约0.4单位的上升.
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