樟子松赤枯病病原菌及其生物防治技术的研究

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本文研究了帽儿山实习林场、内蒙古通辽大青沟自然保护区、吉林白城子的樟子松赤枯病的标本进行了采集、分离、纯化和鉴定,确定了引起樟子松赤枯病的病原菌,解决了樟子松赤枯病病原菌长期没有定论的问题;同时对病原菌的生物学特性进行了研究;以校园内樟子松叶栖真菌的群落组成为基础,通过平板对峙实验筛选出具有开发利用潜能的拮抗菌株;通过林间小试试验,为樟子松赤枯病的生物防治打下了基础。主要研究结果如下:1、用形态学和分子生物学相结合的方法,对樟子松赤枯病的病原菌进行了鉴定,为柠檬拟盘多毛孢[Pestalotiopsis citrina(MeAipine)Nag Raj],在NCBI中已注册,获取登录号为:KR065415。2、通过对病原菌生物学特性的实验,得出该病原菌檬拟盘多毛孢[Pestalotiopsis citrina(MeAipine)Nag Raj]最适生长温度为22℃;对酸碱度适应能力较强,在pH为4.5~9.2的范围内均能生长,但在pH值为6.2是菌丝生长最为迅速;病原菌在以葡萄糖为碳源培养基上生长最好,以蛋白胨为氮源的培养基上生长最快;在全黑暗的条件下菌丝生长最快,在变温条件下病原菌易产孢;病原菌孢子在10-30℃的范围内均可萌发,但在15℃下孢子的萌发率最高为90.5%,随温度的增加萌发率下降;随相对湿度的降低孢子萌发率下降,在相对湿度100%(即水滴中)时,萌发率可达到最大为83.21%,相对湿度低于80%时孢子基本停止萌发;在2%葡萄糖为营养液中萌发率最高为87.4%,孢子的萌发率受营养液成分的影响很大。3、通过对樟子松叶栖真菌的群落的研究,得出叶栖真菌的种类较丰富,共分离出25种真菌,其中,半知菌种类最多,子囊菌次之,接合菌最少。其半知菌中优势种为Penicillium sp.、Alternaria sp.、JPaecilomyces sp.和 Pestalitioposis sp.,分离率分别为19.7%、15.2%、15.5%和10.0%。叶栖真菌的种类随针叶年龄的增加而增加,1a生分离出12种真菌,2a生16种,3a生18种。4、在选出的11种生防菌与病原菌的平板对峙试验中,长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)对病原菌菌丝的抑制效果最强,抑制率为72.81%,其次为血红毛壳(Chaetomium cruentum)、印度毛壳(Chaetomium indicum),抑制率分别为 49.16%和42.36%,这三种真菌对病原菌的抑制率均能达到40%以上。根据生防菌对病原菌的抑菌率、拮抗系数和被覆盖的程度等指标,最终筛选出可以有效抑制樟子松赤枯病病原菌的拮抗菌株为长枝木霉(Trichoiderma longibrachitatum)、血红毛壳(Chaetomium cruentum)和印度毛壳(Chaetomium indicum)。5、三种生防菌的培养滤液对樟子松病原菌菌丝生长和孢子萌发抑制作用差别均较大,对菌丝抑制率最高的是MQ3血红毛壳(Chaetomium cruentum),在培养滤液含量为50%时抑制率为73.48%。对孢子萌发抑制作用最强的是MQ2印度毛壳(Chaetomium indicum),24h时抑制率仍达到98%以上。6、通过生防菌的林间防治试验,发现三种生防菌对樟子松赤枯病均有防治效果,且差异较大。先喷三种混合生防菌再喷病原菌的效果最好,防治效果为90.61%;后喷生防菌的防治效果均较差,最差的为先病原菌再喷三种混合生防菌,防治效果仅有4.76%,得出筛选的生防菌具有较好的预防作用,而治疗作用较差。
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