3H—吲哚荧光探针的研究

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应用有机小分子荧光探针研究蛋白质的结构与功能一直是化学与生物领域的热点课题之一。综观近年来与蛋白质作用的有机小分子荧光探针大多数是一些广泛应用的有机染料或是一些常见的药物,基于蛋白质结构而专门设计合成的用于蛋白质研究的有机荧光探针比较少。吲哚与色氨酸相似,而色氨酸是蛋白质氨基酸中三个具有内源荧光氨基酸中的主要一个。取代3H-吲哚化合物,是一种新型的荧光探针分子。它对所处微环境的变化具有很高的灵敏性,是一类很好的用于研究微环境变化的探针分子。本文基于此设计探测蛋白质结构与功能的特定取代3H-吲哚探针分子,合成了2-(对-氨基苯基)-3,3-二甲基-3H-吲哚荧光分子。并用红外、核磁、薄层层析及柱层析等多种手段,对合成得到的化合物进行了分离、提纯和鉴定。 在生物体系中,蛋白质是必不可少的生命物质,有关血清蛋白与各种荧光探针之间相互作用的研究是目前生命科学、化学和临床医学中共同关注的课题。本文以荧光技术研究新型探针分子—2-(对-氨基苯基)-3,3-二甲基-3H-吲哚(A)与牛血清蛋白(BSA)结合反应的特征。结果表明,A分子与BSA结合作用可使A分子的荧光强度增强,荧光强度与BSA含量呈线性关系。同时测定了结合常数(K=1.82×10<5>L/mol),依据 Foster非辐射能量转移理论,确定了授体-受体间的结合距离(r=23.4 A)和能量转移效率,采用同步荧光技术考察了A对BSA构象的影响。
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